Everolimus (RAD001)作為mTOR抑制劑在炎癥、免疫調(diào)節(jié)中的應(yīng)用

Everolimus（依維莫司，AbMole）是一種雷帕霉素（Rapamycin）的衍生物，能特異性抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）復合物1（mTORC1）的絲氨酸-蘇氨酸激酶活性，調(diào)控下游信號通路，包括降低p-p70S6K、p-4EBP1、p-S6K及核糖體蛋白S6（RPS6）的磷酸化水平，誘導自噬（該過程可被3-Methyladenine Chloroquine 或Bafilomycin A1 阻斷）、觸發(fā)G0/G1期細胞周期阻滯、促進凋亡，并影響糖酵解和炎癥因子分泌。Everolimus（RAD001）具有抗腫瘤活性，例如在786-0、ACHN等透明細胞癌及乳頭狀癌細胞系中，1–10 µM 的Everolimus能劑量依賴性地抑制細胞增殖[1]。Everolimus（SDZ-RAD，AbMole）在部分耐藥的腫瘤細胞中（如MCF-7:5C和MCF-7:2A），能誘導G1期阻滯（下調(diào)cyclin D1、p21），降低ER表達與轉(zhuǎn)錄活性、HSP90的水平，并恢復細胞對4-羥基他莫昔芬（4-Hydroxytamoxifen） 的敏感性[2]。

此外，在PI3K/PTEN突變的三陰性乳腺癌CAL-51細胞中，Everolimus（CAS No.：68047-06-3）與Gefitinib（吉非替尼）聯(lián)用顯著抑制mTOR/P70S6K磷酸化及4E-BP1激活，誘導凋亡[3]。Everolimus（依維莫司）還具有抗病毒與免疫調(diào)節(jié)活性，例如在巨細胞病毒（CMV）感染的細胞模型中，實驗人員發(fā)現(xiàn)Everolimus通過抑制mTORC1，顯著減少感染細胞數(shù)量（降至對照組40%），抑制病毒DNA合成與釋放[4]；在AGS細胞中，Everolimus能抑制NF-κB通路，減輕幽門螺桿菌誘導的ROS/MDA水平，降低IL-6、TNF-α、IL-8等促炎因子表達及THP-1細胞的黏附[5]。Everolimus還能抑制動物器官移植模型中的免疫排斥反應(yīng)，例如在肝臟和腎臟移植模型中能夠有效抵抗排斥反應(yīng)，促進Treg生成，增強免疫耐受[6]。

范例詳解
Oncogene. 2020 Apr;39(15):3163-3178.

實驗人員在該文章中使用了由AbMole提供的Trametinib (JTP-74057，AbMole，M1759) , Chloroquine (磷酸氯喹，AbMole，M2510) , Rapamycin (雷帕霉素，AbMole，M1768) , RAD001 (Everolimus，AbMole，M1909) , and MG132 (AbMole，M1902) 。實驗人員探究了膠質(zhì)母細胞瘤中EGFR-ZNF263信號軸如何通過表觀遺傳機制沉默SIX3基因。在實驗中，Rapamycin 、Chloroquine、RAD001等用于證實mTOR及自噬信號通路在SIX3基因沉默過程中的作用；而MG132 和Trametinib 則分別用于闡述蛋白酶體和MEK通路與SIX3基因沉默的相關(guān)性。

 

圖 1. The MAPK pathway is the main downstream effector of EGFR-mediated epigenetic silencing of SIX3[7].

 
參考文獻及鳴謝
[1] Kornakiewicz, A.; Czarnecka, A. M.; Khan, M. I.; et al. Effect of Everolimus on Heterogenous Renal Cancer Cells Populations Including Renal Cancer Stem Cells. Stem cell reviews and reports 2018, 14 (3), 385-397.
[2] Lui, A.; New, J.; Ogony, J.; et al. Everolimus downregulates estrogen receptor and induces autophagy in aromatase inhibitor-resistant breast cancer cells. BMC cancer 2016, 16, 487.
[3] El Guerrab, A.; Bamdad, M.; Bignon, Y. J.; et al. Co-targeting EGFR and mTOR with gefitinib and everolimus in triple-negative breast cancer cells. Scientific reports 2020, 10 (1), 6367.
[4] Tan, L.; Sato, N.; Shiraki, A.; et al. Everolimus delayed and suppressed cytomegalovirus DNA synthesis, spread of the infection, and alleviated cytomegalovirus infection. Antiviral research 2019, 162, 30-38.
[5] Liu, J.; Zhang, F.; Zhang, Z.; et al. Everolimus ameliorates Helicobacter pylori infection-induced inflammation in gastric epithelial cells. Bioengineered 2022, 13 (5), 11361-11372.
[6] Levitsky, J.; Miller, J.; Huang, X.; et al. Immunoregulatory Effects of Everolimus on In Vitro Alloimmune Responses. PloS one 2016, 11 (6), e0156535.
[7] Yu, Z.; Feng, J.; Wang, W.; et al. The EGFR-ZNF263 signaling axis silences SIX3 in glioblastoma epigenetically. Oncogene 2020, 39 (15), 3163-3178.