In vivo CAR-T包膜蛋白選擇

本文來源于微信公眾：讀且思 作者： 讀且思

VSV-G在多款離體CAR-T中經(jīng)歷了大量使用，多款使用VSV-G包膜蛋白的CAR-T已經(jīng)上市，對(duì)VSV-G的研究也比較深入（包括晶體結(jié)構(gòu)、和受體的結(jié)合位點(diǎn)等），因此，在病毒載體路線的in vivo CAR-T研究中，很多公司首選選擇VSV-G作為病毒包膜。由于VSV-G包膜蛋白的受體在人體多組織中廣泛表達(dá)，為避免靶向非目的細(xì)胞，需要對(duì)VSV-G進(jìn)行去嗜性突變。但目前VSV-G可突變的去嗜性位點(diǎn)已經(jīng)被大量研究，且被專利保護(hù)，后來者想進(jìn)行病毒載體的體內(nèi)CAR-T研究，就需要嘗試其他的病毒包膜蛋白。如Umojia使用的Cocal-V-G蛋白，易慕峰使用的MxV-G包膜蛋白，Sana使用的尼帕病毒（G+F）等。

一個(gè)可用于In vivo CAR-T的包膜蛋白需具備以下特點(diǎn)：

1. 低免疫原性，在人群中預(yù)存抗體比例較低；
2. 較好的穩(wěn)定性。可以耐受一定的剪切、高鹽、低pH，具有一定的熱穩(wěn)定性，以便用于工業(yè)生產(chǎn)純化；
3. 對(duì)細(xì)胞毒性較低，以便使用293細(xì)胞進(jìn)行病毒包裝；
4. 具有較高的病毒滴度以降低生產(chǎn)成本；
5. 在人細(xì)胞中的受體已知，以便進(jìn)行去嗜性突變研究；
6. 已有研究較為深入，例如有晶體結(jié)構(gòu)、受體結(jié)合的氨基酸位點(diǎn)等，以便針對(duì)性的進(jìn)行突變研究；

目前除水泡性口炎病毒VSV-G外，可以嘗試的病毒包膜蛋白有：

• 副粘病毒科：尼帕病毒NIv的包膜糖蛋白NIv-G/F（NiV-G負(fù)責(zé)受體識(shí)別與細(xì)胞附著、NiV-G負(fù)責(zé)融合）；麻疹病毒MeV的MeV-H蛋白（負(fù)責(zé)搜體積結(jié)合）和MeV-F蛋白（介導(dǎo)膜融合）；松嶺病毒SGLV的糖蛋白G（Gn負(fù)責(zé)受體結(jié)合，Gc介導(dǎo)膜融合）；亨德拉病毒HeV的HeV-G蛋白（負(fù)責(zé)受體結(jié)合）和HeV-F（介導(dǎo)膜融合）；Puerto Almendras 病毒、Le Dantec 病毒糖蛋白G
• 桿狀病毒科：桿狀病毒 的Gp64
• 沙粒病毒科：拉沙病毒的LPGP
• 彈狀病毒科糖蛋白：Puerto Almendras 病毒糖蛋白G；Cocal病毒的糖蛋白Cocal-G
• 絲狀病毒科糖蛋白：埃博拉病毒糖蛋白 GP（GP1負(fù)責(zé)受體識(shí)別，GP2介導(dǎo)膜融合）
• 正粘病毒科：流感病毒的HA蛋白（血凝素，Hemagglutinin，HA；HA1亞基負(fù)責(zé)受體結(jié)合，HA2亞基負(fù)責(zé)膜融合）
• 偏肺病毒科：禽類偏肺病毒
• 副粘病毒科 / 其他：陽光病毒、新城疫病毒

如EsoBiocec研究的Lassa病毒的LVGP1（Y150A突變）：

（SupT1是CD3陰性T腫瘤細(xì)胞，Jurkat是CD3陽性T腫瘤細(xì)胞）