Concanamycin A(Con A)作為V-ATP酶抑制劑在自噬和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

Concanamycin A (Con A，F(xiàn)olimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 是一種大環(huán)內(nèi)酯類化合物，作為V-ATP酶（液泡型ATP酶）的特異性抑制劑，在基礎(chǔ)研究中被廣泛應(yīng)用。其作用機(jī)制主要涉及抑制V-ATP酶的質(zhì)子泵功能，從而干擾細(xì)胞器酸化及依賴pH的細(xì)胞活動(dòng)。Concanamycin A可誘導(dǎo)溶酶體、胞內(nèi)體等酸性細(xì)胞器的pH值升高，進(jìn)而影響蛋白質(zhì)降解、自噬體成熟及離子穩(wěn)態(tài)。Concanamycin A 在 0.1 μM 濃度下即可顯著抑制V-ATP酶活性，如在黑色素瘤細(xì)胞（A375、SK-MEL-28）中抑制H⁺泵功能[1]。在HEK293細(xì)胞中，Concanamycin A（0.1 μM）通過阻斷自噬體-溶酶體融合，增加自噬相關(guān)的囊泡積累。在前列腺癌細(xì)胞（LNCaP、22Rv1）中，Concanamycin A（刀豆素A，10 nM）聯(lián)合其他抑制劑（如Enzalutamide ）可協(xié)同降低雄激素受體（AR）信號(hào)通路的活性[1]。Concanamycin A（CAS No.：80890-47-7）在原代AML細(xì)胞（患者來源）中呈現(xiàn)劑量依賴性的抗增殖與促凋亡效應(yīng)（劑量范圍：10–100 nM）[2]。Concanamycin A還能以0.1 μM的濃度在小鼠成骨細(xì)胞中抑制溶酶體酸化，降低組織蛋白酶B的活性[3]。Concanamycin A (Con A，F(xiàn)olimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 在大鼠模型中，靜脈注射（劑量為1 mg/kg）可用于研究V-ATP酶對(duì)CD36蛋白亞細(xì)胞循環(huán)的調(diào)控，并揭示其在心肌脂質(zhì)代謝紊亂中的作用。

Int J Mol Sci. 2021 Aug 16;22(16):8779.
華南師范大學(xué)的科研人員使用了AbMole的Protein Synthesis IN-1 (AbMole, M4879) 、MG132 (AbMole, M1902) , Concanamycin A (Con A，F(xiàn)olimycin，刀豆素A，AbMole，M7737) 。實(shí)驗(yàn)人員研究了植物在缺鐵條件下，自噬途徑如何介導(dǎo)ESCRT組件中FREE1的降解。研究發(fā)現(xiàn)：FREE1是植物ESCRT復(fù)合物的特有成分，在缺鐵時(shí)會(huì)被轉(zhuǎn)運(yùn)到液泡中降解，泛素化的FREE1蛋白的液泡轉(zhuǎn)運(yùn)由自噬途徑介導(dǎo)。自噬缺陷突變體（atg5-1和atg7-2）積累更多的FREE1蛋白，并對(duì)缺鐵表現(xiàn)出超敏反應(yīng)，在缺鐵條件下，自噬相關(guān)基因上調(diào)，促進(jìn)FREE1的自噬降解，從而可能減輕FREE1對(duì)鐵吸收的抑制作用。Protein Synthesis IN-1作為蛋白質(zhì)合成抑制劑，用于追蹤FREE1蛋白的半衰期和降解過程。Concanamycin A 是一種液泡H+-ATP酶抑制劑，能顯著阻斷CHX處理后FREE1蛋白水平的下降，表明FREE1主要通過液泡依賴機(jī)制降解。
參考文獻(xiàn)及鳴謝
[1] Costa, G. A.; de Souza, S. B.; da Silva Teixeira, L. R.; et al. Tumor cell cholesterol depletion and V-ATPase inhibition as an inhibitory mechanism to prevent cell migration and invasiveness in melanoma. Biochimica et biophysica acta. General subjects 2018, 1862 (3), 684-691.
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