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高通量蛋白組學(xué)(Olink)的技術(shù)原理、優(yōu)勢(shì)、樣本要求及應(yīng)用領(lǐng)域

瀏覽次數(shù):351 發(fā)布日期:2026-1-21  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
一、Olink技術(shù)基本原理
Olink 技術(shù)的核心是獨(dú)有的鄰位延伸分析技術(shù)(PEA),該技術(shù)通過(guò)特異性探針設(shè)計(jì)與核酸擴(kuò)增檢測(cè)相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)的精準(zhǔn)定量分析。其具體反應(yīng)機(jī)制如下:
首先,針對(duì)每個(gè)目標(biāo)蛋白質(zhì),設(shè)計(jì)一對(duì)帶有獨(dú)特核苷酸序列的特異性抗體探針。當(dāng)這對(duì)抗體探針與樣本中的目標(biāo)蛋白質(zhì)特異性結(jié)合后,若兩者處于正確的鄰位關(guān)系,其末端的 5bp 配對(duì)堿基會(huì)發(fā)生互補(bǔ)結(jié)合。隨后,在延伸酶的催化作用下,這對(duì)探針會(huì)形成完整的雙鏈 DNA 模板。最后,利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(qPCR)或下一代測(cè)序技術(shù)(NGS)對(duì)該雙鏈 DNA 模板進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè),通過(guò)特異性核苷酸序列的信號(hào)強(qiáng)度來(lái)反向推算目標(biāo)蛋白質(zhì)的含量。
這種 “抗體結(jié)合 - 探針互補(bǔ) - 核酸擴(kuò)增” 的技術(shù)路線,從根本上保證了檢測(cè)的特異性和靈敏度,為微量樣本中低豐度蛋白質(zhì)的檢測(cè)提供了可靠的技術(shù)基礎(chǔ)。
      
二、Olink技術(shù)核心優(yōu)勢(shì)
(一)高特異性與高靈敏度
Olink 技術(shù)憑借 PEA 的獨(dú)特設(shè)計(jì),能夠有效識(shí)別相似度高達(dá) 90% 的同源蛋白,大幅降低了交叉反應(yīng)帶來(lái)的干擾,展現(xiàn)出卓越的檢測(cè)特異性。同時(shí),該技術(shù)的檢測(cè)靈敏度可達(dá) fg/ml 級(jí)別,能夠精準(zhǔn)捕捉樣本中低豐度蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,滿足了生物醫(yī)學(xué)研究中對(duì)微量生物標(biāo)志物檢測(cè)的需求。
 
(二)高通量與靈活擴(kuò)展性
Olink 技術(shù)具備強(qiáng)大的高通量檢測(cè)能力,單次檢測(cè)可產(chǎn)生數(shù)百萬(wàn)數(shù)據(jù)點(diǎn),能夠同時(shí)檢測(cè) 21 種至 384 種蛋白質(zhì),通過(guò)技術(shù)擴(kuò)展最多可實(shí)現(xiàn) 3072 種蛋白質(zhì)的同步檢測(cè)。這種高通量特性使得研究人員能夠在單次實(shí)驗(yàn)中獲取大量蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù),顯著提高了研究效率,降低了實(shí)驗(yàn)成本。
    
(三)樣本適應(yīng)性強(qiáng)
Olink 技術(shù)對(duì)樣本的需求量極少,僅需 1-8μL 樣本即可完成檢測(cè),且適用于多種類型的樣本,包括細(xì)胞裂解液、血清、血漿(EDTA 血漿、檸檬酸血漿、肝素血漿)、間質(zhì)液體、組織裂解液、腦脊髓液、細(xì)胞培養(yǎng)基、微量透析液、穿刺活檢樣本、干血點(diǎn)、滑膜液、血小板提取物、唾液、尿液等。廣泛的樣本適應(yīng)性使得該技術(shù)能夠應(yīng)用于不同的研究場(chǎng)景,為多樣化的樣本檢測(cè)提供了便利。
 
(四)寬動(dòng)態(tài)范圍與高精準(zhǔn)度
該技術(shù)具有寬泛的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍,檢測(cè)區(qū)間覆蓋 10 個(gè)數(shù)量級(jí),能夠同時(shí)檢測(cè)樣本中高豐度和低豐度的蛋白質(zhì)。此外,Olink 技術(shù)的檢測(cè)精準(zhǔn)度極高,批內(nèi)變異系數(shù)(intra)小于 10%,批間變異系數(shù)(inter)小于 20%,確保了檢測(cè)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性,為數(shù)據(jù)的科學(xué)分析提供了有力保障。
       
三、Olink技術(shù)樣本要求
為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,Olink 技術(shù)對(duì)樣本提出了明確的要求:
✔️蛋白總濃度需控制在 0.5-1mg/ml;
✔️樣本類型需為非 FFPE(福爾馬林固定石蠟包埋)樣本;
✔️血液類樣本(血清或血漿)需提供≥50μL,最多不超過(guò) 100μL;
✔️所有樣本需冷凍保存,并采用干冰運(yùn)輸;
✔️除上述明確列出的樣本類型外,其他特殊樣本類型的檢測(cè)需提前咨詢技術(shù)支持人員。
嚴(yán)格遵循樣本要求是確保 Olink 技術(shù)充分發(fā)揮其性能優(yōu)勢(shì)的前提,能夠有效避免因樣本質(zhì)量問(wèn)題導(dǎo)致的檢測(cè)誤差。
      
四、Olink技術(shù)主要應(yīng)用領(lǐng)域
(一)精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域
在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)研究中,Olink 技術(shù)發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過(guò)對(duì)個(gè)體蛋白質(zhì)組學(xué)特征的分析,能夠?qū)崿F(xiàn)疾病的早期預(yù)測(cè)、患者分層以及治療效果的精準(zhǔn)評(píng)估。該技術(shù)可用于識(shí)別與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)標(biāo)志物(包括 pQTLs 相關(guān)標(biāo)志物),幫助研究人員更好地理解疾病發(fā)生、發(fā)展的生物學(xué)機(jī)制,為精準(zhǔn)診斷和個(gè)性化治療方案的制定提供依據(jù)。此外,在健康管理領(lǐng)域,Olink 技術(shù)能夠?qū)⑸罘绞脚c健康狀況及疾病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián),為疾病的預(yù)防和健康干預(yù)提供科學(xué)指導(dǎo)。

(二)藥物研發(fā)全流程
Olink 技術(shù)能夠?yàn)樗幬镅邪l(fā)的各個(gè)階段提供全面的技術(shù)支持,賦能藥企加速新藥研發(fā)進(jìn)程:
✔️藥物發(fā)現(xiàn)階段:可用于識(shí)別潛在的藥物靶點(diǎn),篩選疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物,探索藥物作用的分子機(jī)制,明確疾病發(fā)生的關(guān)鍵途徑;
✔️臨床前研究階段:通過(guò)體內(nèi) / 體外測(cè)試,評(píng)估藥物的安全性和有效性,確定藥物的最佳劑量,為后續(xù)臨床試驗(yàn)提供數(shù)據(jù)支持;
✔️臨床試驗(yàn)階段(Ⅰ-Ⅲ 期):在臨床 Ⅰ 期,可用于評(píng)估藥物的安全性和劑量相關(guān)性;臨床 Ⅱ 期,能夠監(jiān)測(cè)藥物的功效及不良事件,對(duì)患者進(jìn)行分層;臨床 Ⅲ 期,可進(jìn)一步驗(yàn)證藥物的療效,監(jiān)控長(zhǎng)期安全性和副作用,發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè)性或預(yù)后性生物標(biāo)志物;
✔️FDA 審批階段:憑借符合監(jiān)管要求的數(shù)據(jù),為藥物審批提供有力支撐;
✔️上市后監(jiān)測(cè)階段:用于探索藥物的長(zhǎng)期活性,評(píng)估療效穩(wěn)定性,監(jiān)控潛在的長(zhǎng)期副作用,為藥物的臨床應(yīng)用和優(yōu)化提供持續(xù)的數(shù)據(jù)支持。此外,該技術(shù)還可用于執(zhí)行分析驗(yàn)證,啟動(dòng)伴隨診斷(CDx)的開發(fā),進(jìn)一步推動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)療與藥物研發(fā)的深度融合。

五、結(jié)論
Olink 技術(shù)作為高通量蛋白組學(xué)領(lǐng)域的先進(jìn)技術(shù),憑借其高特異性、高靈敏度、高通量、樣本適應(yīng)性強(qiáng)等核心優(yōu)勢(shì),以及完善的質(zhì)量控制體系和廣泛的學(xué)術(shù)與監(jiān)管認(rèn)可度,在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用價(jià)值。該技術(shù)不僅為研究人員提供了強(qiáng)大的蛋白質(zhì)組學(xué)研究工具,助力新的生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)和疾病機(jī)制解析,還為藥物研發(fā)全流程提供了合規(guī)、可靠的數(shù)據(jù)支持,加速了新藥研發(fā)進(jìn)程和精準(zhǔn)醫(yī)療的落地實(shí)施。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和優(yōu)化,Olink 技術(shù)有望在更多生命科學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,為人類健康事業(yè)的發(fā)展做出更大貢獻(xiàn)。
    
六、高通量蛋白組Olink檢測(cè)技術(shù)哪個(gè)公司有?
LabEx為您提供前沿、精準(zhǔn)的高通量蛋白組Olink檢測(cè)技術(shù)完整解決方案;贠link PEA(鄰位延伸分析)專利技術(shù),我們能夠在極高靈敏度和特異性下,對(duì)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等多種微量生物樣本中多達(dá)數(shù)千種蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物進(jìn)行同步、絕對(duì)定量檢測(cè)。
貨號(hào) Panel名稱 種屬 檢測(cè)指標(biāo)
LXOH96-1 人Olink 炎癥96因子Panel Human

CD6,KITLG,IL18,SLAMF1,TGFA,CCL13,CCL11,TNFSF14,FGF23,IL10RA,CCL4,FGF5,LIFR,FGF21,CCL19,IL15RA,

IL10RB,IL22RA1,IL18R1,CD274,NGF,CXCL5,MMP1,TNFSF11,TSLP,IL2,VEGFA,CCL7,GDNF,CDCP1,

CD244,IL7,TNFRSF11B,TGFB1,PLAU,IL6,CXCL1,IL17C,IL17A,CXCL11,AXIN1,TNFSF10,IL20RA,CXCL9,CST5,

IL2RB,IL1A,OSM,CCL2,CXCL8,DNER,CCL28,SIRT2,IL20,EIF4EBP1,CXCL10,CXCL6,FLT3LG,S100A12,CCL3,CCL23,TNF,

IL10,MMP10,ARTN,IL13,IL24,IL12B,CD5,HGF,CD40,IFNG,CSF1,LTA,ADA,IL5,STAMBP,SULT1A1,CCL20,

TNFSF12,IL33,NTF3,CX3CL1,CCL25,CASP8,CCL8,NRTN,LIF,IL4,FGF19,TNFRSF9,CD8A

LXOH1000-1 人Olink Reveal 高通量多因子篩選Panel Human

ACAA1,ACP3,ADAM12,ADGRG3,ADH4,AFAP1L2,AIF1,AKAP8,ALK,ANP32E,AOC1,APEX1,ARHGEF2,

ATAD3B,ATF1,ATF2,ATP6V0D1,BACE1,BAIAP2,BTLA,BTNL9,C8orf34,CAMK4,CD300LB,CEBPA,CENPS,

CFDP1,CHRM1,CHRM3,CHST2,CLTA,CSF3,CYLD,DDX60,DHX36,DYNC1I2,ECSIT,EDNRB,ERG,EVL,FBXO40,

GAP43,GBP3,GSDMD,HRH1,IFIT1,IFNB1,IFNG,IFNL4,IL10RA,IL11RA,IL17F,IL20RA,IRAK1BP1,ITGAV,

LTK,MAFB,MAPKAP1,MEF2C,MPST,MTAP,MYO1E,NBEAL2,NCF1C_NCF1,NCR3,NDUFS6,PCNA,PDE4C,

PLCG1,PSMB11,PTPN11,PTPN14,RIGI,RIPK3,RNF135,RNF213,RYK,SDHAF4,SIKE1,SMAD2,SPN,STK11IP,

STK39,TARDBP,TFEB,TRIM41,TSC22D3,UBE2E2,UBR2,

樂(lè)備實(shí)(上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司旗下全資子公司),是國(guó)內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測(cè)以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗(yàn)服務(wù)專家,自2018年成立以來(lái),樂(lè)備實(shí)不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺(tái)已擴(kuò)展到單細(xì)胞測(cè)序、空間多組學(xué)、流式檢測(cè)、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測(cè)、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個(gè),建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗(yàn)的完整檢測(cè)體系。

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