文章分享：雙靶向“乒乓”CAR-T細(xì)胞破解實(shí)體瘤免疫治療瓶頸

文章來(lái)源公眾號(hào)：CGT未來(lái)            作者：細(xì)胞也迷茫

嵌合抗原受體（Chimeric Antigen Receptor, CAR）T細(xì)胞療法在B細(xì)胞惡性腫瘤（如B細(xì)胞淋巴瘤和白血�。┲腥〉昧孙@著成功，主要得益于CAR-T細(xì)胞在外圍血液中的強(qiáng)勁擴(kuò)增和長(zhǎng)期持久性。這種擴(kuò)增與無(wú)進(jìn)展生存期和總生存期密切相關(guān)。然而，將這一成功擴(kuò)展到實(shí)體瘤面臨重大挑戰(zhàn)：實(shí)體瘤靶抗原通常不表達(dá)于外圍組織，導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞無(wú)法在外圍激活和擴(kuò)增，從而限制其向腫瘤部位的有效遷移。此外，實(shí)體瘤的免疫抑制性微環(huán)境、異質(zhì)性和低抗原表達(dá)進(jìn)一步加劇了問(wèn)題。高劑量CAR-T細(xì)胞輸注可能引發(fā)“首過(guò)效應(yīng)”（first-pass effect），即CAR-T細(xì)胞在肺部首次通過(guò)時(shí)檢測(cè)到健康組織上的低水平抗原，導(dǎo)致靶向外毒性（on-target, off-tumor toxicity）。

最近，Carl H. June在《PNAS》發(fā)文“Dual- targeted ping- pong CAR T cells: Leveraging peripheral expansion to improve solid tumor immunotherapy”，利用內(nèi)源性非必需抗原CD19（表達(dá)于B細(xì)胞）來(lái)驅(qū)動(dòng)擴(kuò)增。本研究將CD19和實(shí)體瘤靶向CAR整合到一個(gè)T細(xì)胞中，使用獨(dú)特的信號(hào)域（CD19/28ζ和腫瘤4-1BBζ）來(lái)模擬T細(xì)胞激活的時(shí)序：外圍通過(guò)B細(xì)胞誘導(dǎo)CD28ζ信號(hào)，腫瘤中誘導(dǎo)4-1BBζ信號(hào)。這種“乒乓”（ping-pong）振蕩機(jī)制可避免下游功能障礙，促進(jìn)休息-恢復(fù)周期。優(yōu)化后，雙重CAR設(shè)計(jì)（CD19/28ζ-M5BBζ）降低了非特異性擴(kuò)增和對(duì)低抗原健康組織的反應(yīng)性，同時(shí)保持了對(duì)高抗原腫瘤的細(xì)胞毒性。該策略旨在將血液腫瘤的長(zhǎng)期療效擴(kuò)展到實(shí)體瘤，而無(wú)需淋巴耗竭。

雙靶向CAR-T細(xì)胞在外周通過(guò)外周血、脾臟和骨髓的遷移過(guò)程

主要結(jié)果
①在沒(méi)有進(jìn)行淋巴細(xì)胞清除的情況下，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞在外周血中顯著擴(kuò)增，且擴(kuò)增水平高于單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞（A03BBζ或CD19/28ζ）。

②在“熱”腫瘤模型中，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞在PDAC 2838c3模型中表現(xiàn)出顯著的腫瘤控制能力，與單靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞（A03BBζ）相比，能夠顯著降低腫瘤體積，延長(zhǎng)小鼠生存期，表現(xiàn)出更高的治療效果。在“冷”腫瘤模型中，單獨(dú)使用雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效果有限，但與αPDL-1或trCD19-AdV聯(lián)合使用時(shí)，療效顯著增強(qiáng)，尤其是trCD19-AdV的聯(lián)合使用顯著延長(zhǎng)了生存期。

③雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞在脾臟和骨髓中具有強(qiáng)大的擴(kuò)增能力和持久的B細(xì)胞清除效果，同時(shí)其活化狀態(tài)能夠得到有效調(diào)控，避免功能失調(diào)。此外，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞還能夠激活內(nèi)源性T細(xì)胞，進(jìn)一步增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。

④雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞能夠有效克服實(shí)體瘤治療中的關(guān)鍵障礙，即腫瘤浸潤(rùn)不足和功能失調(diào)問(wèn)題。雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞不僅能夠在腫瘤微環(huán)境中顯著擴(kuò)增和浸潤(rùn)，還能保持活化狀態(tài)和效應(yīng)功能，最終實(shí)現(xiàn)更強(qiáng)的腫瘤清除效果。

⑤雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞通過(guò)清除CD19+ B細(xì)胞實(shí)現(xiàn)了抗原依賴的動(dòng)態(tài)擴(kuò)增。當(dāng)內(nèi)源性B細(xì)胞恢復(fù)時(shí)，雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞能夠再次擴(kuò)增，表現(xiàn)出“乒乓效應(yīng)”。補(bǔ)充外源性B細(xì)胞能夠顯著提高雙靶點(diǎn)CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤效果，表現(xiàn)為腫瘤體積顯著縮小和完全消退的比例增加。

題外延伸
斯丹賽生物（Innovative Cellular Therapeutics, ICT）的CoupledCAR®平臺(tái)與本文的核心設(shè)計(jì)理念和技術(shù)機(jī)制上高度相似。1）使用雙重CAR方法來(lái)刺激免疫系統(tǒng)，以促進(jìn)CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增；2）增強(qiáng)了與腫瘤細(xì)胞遷移相關(guān)的基因表達(dá)，改善了CAR-T細(xì)胞向腫瘤遷移和浸潤(rùn)受到抑制的困境；3）增強(qiáng)了CAR-T細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的殺傷能力，進(jìn)入實(shí)體瘤后，CoupledCAR®可刺激機(jī)體產(chǎn)生、募集更多的免疫細(xì)胞，產(chǎn)生更有效和持久的反應(yīng)。

2025年ASCO年會(huì)，斯丹賽生物報(bào)告GCC19CART產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)的初步結(jié)果，試驗(yàn)采用單次輸注GCC19CART，劑量為1×10⁶ cells/kg（DL1組，n=4）和2×10⁶ cells/kg（DL2組，n=5），患者均為標(biāo)準(zhǔn)治療失敗的重度預(yù)處理人群。

主要療效：客觀緩解率（ORR）整體達(dá)56%（5/9），其中DL1組25%，DL2組高達(dá)80%。疾病控制率（DCR）整體78%，DL2組80%。部分患者出現(xiàn)病理完全緩解（pCR）或完全代謝緩解（CMR），顯示出劑量依賴性臨床活性與持久性。

安全性：總體耐受性可接受，主要不良事件為細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）和GCC靶向相關(guān)的腹瀉/結(jié)腸炎（可管理）。DL2組1例劑量限制性毒性（grade 3腹瀉、grade 4腸炎、grade 5敗血癥），死亡原因系真菌性敗血癥（輸注后48天）。

整體來(lái)說(shuō)，GCC19CART在難治性mCRC中展現(xiàn)出顯著臨床活性和可接受安全性，是實(shí)體瘤CAR-T領(lǐng)域的積極進(jìn)展。​