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氨基偶聯(lián)試劑盒的使用步驟及常見(jiàn)問(wèn)題解答

瀏覽次數(shù):507 發(fā)布日期:2025-11-13  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
在生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,將生物分子(如蛋白質(zhì)、肽、寡核苷酸等)固定到傳感器芯片表面是常見(jiàn)的操作。氨基偶聯(lián)試劑盒提供了一種高效、可靠的方法,幫助研究人員實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
氨基偶聯(lián)試劑盒是一種專(zhuān)門(mén)用于將生物分子固定到傳感器芯片表面的試劑盒。它通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng),將帶有氨基的生物分子與傳感器芯片表面的羧基基團(tuán)連接起來(lái),形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。這種連接方式適用于多種生物分子,廣泛應(yīng)用于表面等離子體共振(SPR)實(shí)驗(yàn)中。

套件組成
1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽 (EDC):750 mg
作用:活化羧基基團(tuán),使其能夠與氨基反應(yīng)。
N-羥基琥珀酰亞胺 (NHS):115 mg
作用:與EDC協(xié)同作用,進(jìn)一步促進(jìn)羧基與氨基的反應(yīng)。
1.0 M 乙醇胺-HCl pH 8.5:10.5 ml
作用:用于終止反應(yīng),防止過(guò)度偶聯(lián)。

儲(chǔ)存條件
溫度:2–8°C
注意事項(xiàng):試劑盒應(yīng)保存在干燥、避光的環(huán)境中,避免反復(fù)凍融。

適用機(jī)型
Biacore 8K+
Biacore 8K
Biacore T200
Biacore S200
Biacore X100
樣品/試劑容量
容量:足以進(jìn)行30至50次偶聯(lián)反應(yīng)。
適用范圍:適用于多種生物分子的固定,包括蛋白質(zhì)、肽、寡核苷酸等。

使用步驟
1. 準(zhǔn)備傳感器芯片
選擇合適的傳感器芯片,確保其表面清潔且功能正常。
2. 活化羧基基團(tuán)
將EDC和NHS溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中,通常使用0.1 M MES緩沖液(pH 5.0–6.0)。
將活化溶液注入傳感器芯片表面,使羧基基團(tuán)活化。
3. 偶聯(lián)生物分子
將帶有氨基的生物分子溶液注入傳感器芯片表面,與活化的羧基基團(tuán)反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。
4. 終止反應(yīng)
使用1.0 M 乙醇胺-HCl(pH 8.5)終止反應(yīng),防止過(guò)度偶聯(lián)。
5. 清洗和檢查
用適當(dāng)?shù)木彌_液清洗傳感器芯片表面,檢查偶聯(lián)效果。

注意事項(xiàng)
活化溶液的配制:確保EDC和NHS的濃度準(zhǔn)確,避免過(guò)高或過(guò)低的濃度影響偶聯(lián)效果。
反應(yīng)時(shí)間:根據(jù)生物分子的性質(zhì)和濃度,調(diào)整反應(yīng)時(shí)間,通常為10-30分鐘。
終止反應(yīng):及時(shí)使用乙醇胺-HCl終止反應(yīng),防止過(guò)度偶聯(lián)導(dǎo)致背景信號(hào)增加。
保存條件:試劑盒應(yīng)保存在2–8°C的環(huán)境中,避免反復(fù)凍融。

常見(jiàn)問(wèn)題解答
Q1:試劑盒可以用于哪些類(lèi)型的生物分子?
A:適用于帶有氨基的生物分子,如蛋白質(zhì)、肽、寡核苷酸等。
Q2:試劑盒的保存條件是什么?
A:2–8°C,避免反復(fù)凍融。
Q3:試劑盒可以進(jìn)行多少次偶聯(lián)反應(yīng)?
A:足以進(jìn)行30至50次偶聯(lián)反應(yīng)。
Q4:使用試劑盒時(shí)需要注意什么?
A:確;罨芤旱臐舛葴(zhǔn)確,調(diào)整反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)終止反應(yīng),避免過(guò)度偶聯(lián)。
Q5:試劑盒適用于哪些機(jī)型?
A:適用于Biacore 8K+、Biacore 8K、Biacore T200、Biacore S200和Biacore X100系統(tǒng)。

產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng):氨基偶聯(lián)試劑盒
套件組成
750 mg 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽 (EDC)
115 mg N-羥基琥珀酰亞胺 (NHS)
10.5 ml 1.0 M 乙醇胺-HCl pH 8.5
儲(chǔ)存條件:2–8°C
適用機(jī)型:Biacore 8K+、Biacore 8K、Biacore T200、Biacore S200和Biacore X100系統(tǒng)
樣品/試劑容量:足以進(jìn)行30至50次偶聯(lián)反應(yīng)

總結(jié)
氨基偶聯(lián)試劑盒是一種高效、可靠的工具,適用于將帶有氨基的生物分子固定到傳感器芯片表面。它通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng),確保生物分子與芯片表面形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵,廣泛應(yīng)用于表面等離子體共振(SPR)實(shí)驗(yàn)中。試劑盒的組成、儲(chǔ)存條件和使用步驟均經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì),確保實(shí)驗(yàn)的成功率和重復(fù)性。
 
名稱(chēng) 貨號(hào) 規(guī)格
OCT包埋劑 abs9756-110mL 110mL
MACS Tissue Storage Solution, 100mL 130-100-008 100ml
Amine Coupling Kit BR100050 1套
發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:15921930842
E-mail:yh-wang@univ-bio.com

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