逆轉(zhuǎn)錄一管化三代預(yù)混液的常見(jiàn)使用問(wèn)題
瀏覽次數(shù):360 發(fā)布日期:2025-11-6
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逆轉(zhuǎn)錄試劑組分多,逐一添加容易污染?
快速合成 cDNA,卻總被長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)拖慢進(jìn)度?
不同 RNA 模板(真核 mRNA、原核 RNA 等)要換不同引物,操作麻煩?
擔(dān)心試劑保存不當(dāng),影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果?
別擔(dān)心,愛(ài)必信助您實(shí)驗(yàn)不 NG!All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix(愛(ài)必信逆轉(zhuǎn)錄一管化三代預(yù)混液,貨號(hào) abs60246-100T),為您的逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)提供高效便捷的解決方案。
產(chǎn)品核心信息
產(chǎn)品名稱(chēng):All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix(愛(ài)必信逆轉(zhuǎn)錄一管化三代預(yù)混液)
貨號(hào):abs60246-100T
規(guī)格:含 All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix 400μl、Nuclease-Free Water(無(wú)酶水)2×1ml
濃度:5×
儲(chǔ)存條件:-20℃保存,有效期 24 個(gè)月
常見(jiàn)問(wèn)題 FAQ(避坑指南)
為幫助您在使用過(guò)程中規(guī)避問(wèn)題,確保實(shí)驗(yàn)效果,以下是高頻問(wèn)題解答:
Q1:這款預(yù)混液里都包含什么,還需要額外準(zhǔn)備試劑嗎?
A:預(yù)混液已包含逆轉(zhuǎn)錄所需全部組分,具體有 M-MLV GIII Reverse Transcriptase(M-MLV GIII 逆轉(zhuǎn)錄酶)、反應(yīng) Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs(合成原料)、Oligo (dT)₂₀VN 和隨機(jī)引物。實(shí)驗(yàn)時(shí)僅需額外準(zhǔn)備 RNA 模板和水,無(wú)需再單獨(dú)配制其他試劑。
Q2:逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)要多久,能合成多長(zhǎng)的 cDNA?
A:使用這款預(yù)混液,15 分鐘內(nèi)即可完成逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),最長(zhǎng)可合成 12kb 大小的 cDNA,能滿足多數(shù)科研場(chǎng)景的需求。
Q3:哪些 RNA 模板能用,miRNA 可以嗎?
A:適用范圍較廣,含 Poly (A) 結(jié)構(gòu)的真核生物 mRNA、不含 Poly (A) 結(jié)構(gòu)的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 都可使用;但不適用于 miRNA 等小 RNA 模板,因小 RNA 片段過(guò)短,現(xiàn)有引物無(wú)法有效結(jié)合啟動(dòng)反應(yīng)。
Q4:產(chǎn)品怎么保存,反復(fù)凍融有影響嗎?
A:需在 - 20℃條件下保存,未開(kāi)封時(shí)有效期 24 個(gè)月。建議避免反復(fù)凍融,可將預(yù)混液分裝后保存,每次使用取出所需分裝量,剩余部分繼續(xù)放回 - 20℃冷凍,以保持試劑活性。
Q5:預(yù)混液濃度是 5×,實(shí)驗(yàn)時(shí)怎么用?
A:5× 為濃縮濃度,實(shí)驗(yàn)時(shí)可根據(jù)反應(yīng)體系需求按比例稀釋?zhuān)缗渲?20μl 反應(yīng)體系時(shí),可加入 4μl 5× 預(yù)混液,再搭配 RNA 模板、無(wú)酶水等補(bǔ)足體積,具體可參考實(shí)驗(yàn) protocol 調(diào)整。
Q6:這個(gè)產(chǎn)品適合新手使用嗎?
A:非常適合。“一管化” 設(shè)計(jì)省去了多組分逐一添加的步驟,操作簡(jiǎn)單,不僅能節(jié)省時(shí)間,還能減少試劑轉(zhuǎn)移過(guò)程中的污染風(fēng)險(xiǎn),新手也能輕松上手。
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