用于衰老研究中高通量篩選的穩(wěn)健無化學(xué)試劑年齡同步線蟲種群維持平臺

傳統(tǒng)的維持年齡同步種群以進(jìn)行多日研究（無需干預(yù)）的方法勞動強(qiáng)度大且通量低，這阻礙了對衰老機(jī)制的研究以及新型衰老干預(yù)措施的發(fā)現(xiàn)。為了解這些局限性，我們開發(fā)了一種新穎、穩(wěn)健的方法，能夠在96孔板液體培養(yǎng)格式中維持年齡同步種群長達(dá)12天，且無需定制設(shè)備。通過優(yōu)化多孔板和一次性耗材的表面組成，并完善培養(yǎng)參數(shù)（包括生命階段、培養(yǎng)基成分和細(xì)菌食物濃度），該方法的穩(wěn)健性得到了顯著提高。為了在整個生命周期中進(jìn)行無偏見的表型評估，我們使用了WMicrotracker ONE讀數(shù)器來監(jiān)測多孔板中線蟲的運(yùn)動和活力。使用我們方法觀察到的整體健康度隨衰老的下降趨勢，與在固體瓊脂上維持的線蟲相當(dāng)。

在本研究中，我們開發(fā)了一個新平臺，用于在沒有任何化學(xué)試劑或基因干預(yù)的情況下，在液體培養(yǎng)中長期維持年齡同步的秀麗隱桿線蟲（C. elegans）種群，以進(jìn)行高通量（HT）篩選（圖1）。該方案從預(yù)先在固體線蟲生長培養(yǎng)基（NGM）上培養(yǎng)的第1天成蟲開始。與傳統(tǒng)方法不同，該方法不需要漂白處理，從而避免了漂白可能引起的表型變化，并支持線蟲使用活性和非活性食物來源，從而能夠在嚴(yán)格控制的環(huán)境中進(jìn)行基因和化合物篩選。

 
我們的結(jié)果表明，我們這一穩(wěn)健的平臺（Z因子超過0.7）可用于化學(xué)庫的高通量篩選，并可能用于專注于成蟲秀麗隱桿線蟲種群的基因組研究。其可擴(kuò)展性和適應(yīng)性使其成為依賴化學(xué)試劑的年齡同步技術(shù)的穩(wěn)健替代方案，對衰老及相關(guān)領(lǐng)域的研究具有重要意義。高通量篩選（HTS）的關(guān)鍵挑戰(zhàn)之一是在獲取大量數(shù)據(jù)以供分析的同時最大化效率。上述方法與WMicrotracker ONE技術(shù)相結(jié)合，無疑將加速高通量篩選過程。
 

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