GW9662作為PPARγ的經(jīng)典拮抗劑在代謝、炎癥和纖維化研究中的應(yīng)用

GW9662（AbMole，M2748）是一種選擇性PPARγ（過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ）拮抗劑，其作用機(jī)制是通過(guò)共價(jià)修飾PPARγ配體結(jié)合域中的Cys285位點(diǎn)，阻斷其與配體的結(jié)合[1]。GW9662在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，常被用于驗(yàn)證PPARγ在信號(hào)通路中的作用或與某一種細(xì)胞生命活動(dòng)的相關(guān)性。例如，GW9662（CAS No.：22978-25-2）在HepG2細(xì)胞中，證實(shí)了PPARγ可調(diào)節(jié)細(xì)胞脂肪酸儲(chǔ)存和葡萄糖代謝[2]。此外，在RAW264.7巨噬細(xì)胞中，GW9662通過(guò)調(diào)控PPARγ影響SREBP1c、FAS等基因的表達(dá)，影響了脂質(zhì)攝取與氧化的平衡。

GW9662在葡萄糖-氧-血清剝奪（GOSD）的小膠質(zhì)細(xì)胞模型中，通過(guò)抑制PPARγ加劇了缺血性炎癥反應(yīng)和細(xì)胞死亡，提示PPARγ在細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)中具有重要作用[3]。在動(dòng)物模型中，GW9662同樣被用于探究PPARγ的生理功能，例如GW9662（1 mg/kg）在高脂飲食（HFD）誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠模型中，通過(guò)抑制PPARγ/CD36通路改善了脂質(zhì)代謝，并調(diào)節(jié)了腸道菌群組成（如減少有害菌Lachnospiraceae_NK4A136_group和Helicobacteraceae）[4]。 GW9662在大鼠腹膜纖維化模型中，通過(guò)抑制PPARγ/GLUT1軸加劇纖維化進(jìn)程；而PPARγ激動(dòng)劑Rosiglitazone（BRL 49653, 羅格列酮,CAS: 122320-73-4）則表現(xiàn)出相反的生物學(xué)效應(yīng)。類(lèi)似地，在Doxorubicin（阿霉素）誘導(dǎo)的小鼠心臟損傷模型中，GW9662通過(guò)拮抗PPARγ加劇了心臟炎癥和凋亡；而PPARγ激動(dòng)劑Pioglitazone（吡格列酮，U 72107，CAS: 111025-46-8）則具有保護(hù)作用[5]。AbMole為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的抑制劑、細(xì)胞因子、人源單抗、天然產(chǎn)物、熒光染料、多肽、靶點(diǎn)蛋白、化合物庫(kù)、抗生素等科研試劑，全球大量文獻(xiàn)專利引用。

范例詳解
Acta Pharmacol Sin. 2020 Mar;41(3):373-382
中國(guó)藥科大學(xué)的科研團(tuán)隊(duì)在上述文章中使用了AbMole的GW9662（AbMole，M2748），實(shí)驗(yàn)人員探究了積雪草酸（Asiatic-acid，AA，CAS: 464-92-6）對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻（UUO）大鼠腎纖維化的預(yù)防作用及其機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，UUO的大鼠模型表現(xiàn)出明顯的腎功能障礙、間質(zhì)纖維化、氧化應(yīng)激以及TGF-β/Smad和Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活。而積雪草酸預(yù)處理能夠顯著改善這些病理變化。進(jìn)一步研究表明，積雪草酸并非直接改變腎臟中PPAR-γ的表達(dá)水平，而是通過(guò)顯著增加PPAR-γ的內(nèi)源性配體15d-PGJ2的血漿水平來(lái)發(fā)揮作用。GW9662作為一種選擇性PPAR-γ拮抗劑，在本研究中被用于驗(yàn)證積雪草酸的作用機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，與GW9662共同處理（1 mg·kg⁻¹ per day, ip）7天，能夠完全消除積雪草酸的保護(hù)作用。這表明積雪草酸的抗纖維化作用是通過(guò)激活PPAR-γ信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的。2014年，AbMole的兩款抑制劑分別被西班牙國(guó)家心血管研究中心和美國(guó)哥倫比亞大學(xué)用于動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，相關(guān)科研成果發(fā)表于頂刊 Nature 和 Nature Medicine。  
*本文所述試劑僅供科研使用
 
參考文獻(xiàn)及鳴謝
[1] Brust, R.; Lin, H.; Fuhrmann, J.; et al. Modification of the Orthosteric PPARgamma Covalent Antagonist Scaffold Yields an Improved Dual-Site Allosteric Inhibitor. ACS chemical biology 2017, 12 (4), 969-978.
[2] Cheng, V.; Reddam, A.; Bhatia, A.; et al. Utilizing systems biology to reveal cellular responses to peroxisome proliferator-activated receptor gamma ligand exposure. Current research in toxicology 2021, 2, 169-178.
[3] Lin, C. H.; Liao, L. Y.; Yang, T. Y.; et al. Microglia-Derived Adiposomes are Potential Targets for the Treatment of Ischemic Stroke. Cellular and molecular neurobiology 2019, 39 (5), 591-604.
[4] Xiao, J.; Xiang, H.; Xiang, H.; et al. GW9662 ameliorates nonalcoholic steatohepatitis by inhibiting the PPARgamma/CD36 pathway and altering the gut microbiota. European journal of pharmacology 2023, 960, 176113.
[5] Pakravan, G.; Peymani, M.; Abedpoor, N.; et al. Antiapoptotic and anti-inflammatory effects of Ppargamma agonist, pioglitazone, reversed Dox-induced cardiotoxicity through mediating of miR-130a downregulation in C57BL/6 mice. Journal of biochemical and molecular toxicology 2022, 36 (6), e23041.
[6] Zhang, Z. H.; He, J. Q.; Zhao, Y. Y.; et al. Asiatic acid prevents renal fibrosis in UUO rats via promoting the production of 15d-PGJ2, an endogenous ligand of PPAR-γ. Acta pharmacologica Sinica 2020, 41 (3), 373-382.