IVIS Spectrum小動(dòng)物活體成像助力中醫(yī)穴位方案優(yōu)化NVs遞送

長(zhǎng)期以來(lái)，通過(guò)傳統(tǒng)方法用納米疫苗（NVs）免疫通常會(huì)導(dǎo)致注射部位的先天免疫細(xì)胞激活不足，抗原向引流淋巴結(jié)（draining lymph node，dLN）的遞送不良，嚴(yán)重研制了適應(yīng)性免疫反應(yīng)的快速和有效誘導(dǎo)。

以前的改進(jìn)方案主要考慮優(yōu)化納米材料的設(shè)計(jì)，而較少考慮注射位點(diǎn)的差異。

這一份來(lái)自上海交通大學(xué)范春海院士和劉盡堯教授的研究指出，通過(guò)中醫(yī)中穴位的方案來(lái)優(yōu)化對(duì)NVs的遞送能更好的激活免疫系統(tǒng)。

首先，通過(guò)對(duì)肌肉注射位點(diǎn)（IM）、足三里穴（ST36）、內(nèi)關(guān)穴（PC6）和后海穴（GV1）的免疫細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞譜分析，結(jié)果顯示與IM區(qū)相比，肥大細(xì)胞在穴位中較為豐富，尤其是足三里穴（ST36）。

為了進(jìn)一步了解穴位遞送納米顆粒（Acupoint Delivery of NVs，AND）能否促進(jìn)NVs直接遞送值dLN，使用Cy5.5標(biāo)記的NVs免疫后的第三天，并借助瑞孚迪（Revvity）IVIS Spectrum對(duì)小鼠及進(jìn)行三維熒光檢測(cè)，結(jié)果顯示，ST36注射小鼠dLN處有較為強(qiáng)烈的熒光信號(hào)。后期對(duì)兩組別小鼠切除dLN成像，結(jié)果也顯示ST36注射使NVs在dLN中快速而持久地積累，這可能歸因于穴位密集分布的淋巴管。為了確定NVs直接遞送給dLNs，小鼠注射抗CCR7單克隆抗體（αCCR7）以消除免疫細(xì)胞從外周向dLNs的遷移。通過(guò)ST36途徑免疫后，αCCR7處理和同種型單克隆抗體（iso）處理的小鼠中dLN中增強(qiáng)的熒光信號(hào)一致。

研究的后續(xù)實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證明了肥大細(xì)胞激活的穴位可以促進(jìn)dLN駐留DC的抗原呈遞，從而放大抗原特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。ADN通過(guò)減少LN轉(zhuǎn)移和增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。

總而言之，這項(xiàng)工作首次揭示了穴位刺激在納米疫苗接種中的重要性，并為開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單而通用的方法以增強(qiáng)各種NV的抗病毒和抗腫瘤功效打開(kāi)了一扇窗。

IVIS® Spectrum小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)