前列腺癌作為全球男性高發(fā)的惡性腫瘤,其去勢(shì)抵抗性和轉(zhuǎn)移性亞型一直是臨床治療難題,傳統(tǒng)療法難以在不損傷健康組織前提下,精準(zhǔn)靶向擊殺傷癌細(xì)胞。Akt1(蛋白激酶B,PKB)是泛癌治療的關(guān)鍵靶點(diǎn),可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活、代謝、生長(zhǎng)和增殖。
然而,目前上市的 Akt 抑制劑毒性大、代謝副作用高,臨床獲益有限。隨著海洋生物活性物質(zhì)成為抗癌藥物研發(fā)的新方向,源自綠色大型藻類滸苔的海洋多糖(Enteromorpha prolifera ,EP)因具有抗炎、抗菌、抗癌等多種生物活性而備受關(guān)注。
來自福建醫(yī)科大學(xué)及其附屬醫(yī)院的聯(lián)合團(tuán)隊(duì)系統(tǒng)研究了 EP 對(duì)前列腺癌細(xì)胞的抗腫瘤作用,并闡明了其潛在的分子機(jī)制,評(píng)估其作為天然來源抗癌劑的治療潛力,相關(guān)研究以“Marine- Derived Enteromorpha prolifera Polysaccharides Suppress Castration- Resistant Prostate Cancer via Akt1 Inhibition”為題發(fā)表在 2025 年 8 月的《The Journal of Gene Medicine》上。
研究針對(duì) HEK 293T、PC-3、DU145、LnCaP(前列腺癌細(xì)胞系)和 RWPE-1(正常前列腺上皮細(xì)胞系)分別開展了藥化實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)分析、BrdU 摻入實(shí)驗(yàn)、BrdU-PI 雙染色流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞遷移侵襲等一系列實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)EP對(duì)前列腺癌癥細(xì)胞系表現(xiàn)出選擇性毒性,而對(duì)正常的前列腺細(xì)胞幾乎無影響。同時(shí)也證明 EP 通過與 Akt1直接相互作用發(fā)揮其抗腫瘤作用,表明 EP 有可能成為侵襲性前列腺癌癥治療的天然Akt1靶向劑。
在細(xì)胞增殖實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)中,作者采用了xCELLigence RTCA系統(tǒng)與InnoME公司的zenCell owl活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像及分析系統(tǒng)聯(lián)合使用的方式,評(píng)估 EP 對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用。
作者選用 DU145細(xì)胞,同時(shí)以RWPE-1 作為對(duì)照。將細(xì)胞以5×10³ 個(gè) / 孔的密度接種到 E-plate 16 孔板中,分別加入 50 μM、100 μM、200 μM 濃度的 EP 及 DMSO(對(duì)照組)處理,持續(xù)監(jiān)測(cè) 120 小時(shí)。使用 RTCA 軟件每2 小時(shí)記錄一次細(xì)胞指數(shù)。同時(shí)使用 zenCell owl每 2 小時(shí)捕捉一次明場(chǎng)圖像,使用GraphPad Prism 9(GraphPad軟件)分析細(xì)胞指數(shù)值隨時(shí)間的變化來生成增殖曲線 。
結(jié)果顯示(下圖):對(duì)照組 DU145 細(xì)胞增殖曲線持續(xù)上升,細(xì)胞密度隨時(shí)間顯著增加;100 μM EP 處理組的細(xì)胞增殖受到明顯抑制,細(xì)胞指數(shù)值較對(duì)照組大幅下降;200 μM EP 處理組幾乎完全阻斷了細(xì)胞增殖。這一結(jié)果證實(shí)了 EP 對(duì) DU145 細(xì)胞增殖的濃度依賴性抑制作用, zenCell owl的實(shí)時(shí)成像功能完整記錄了這一動(dòng)態(tài)過程,捕捉到的明場(chǎng)圖像直觀呈現(xiàn)了細(xì)胞增殖狀態(tài)的差異,為增殖抑制效應(yīng)提供了可視化證據(jù)。
RTCA與zenCELL owl系統(tǒng)的聯(lián)合使用,實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)胞增殖過程的“定量阻抗監(jiān)測(cè)+形態(tài)學(xué)觀察”雙重驗(yàn)證,既獲取了細(xì)胞增殖的動(dòng)態(tài)量化數(shù)據(jù),又通過直觀的明場(chǎng)圖像確認(rèn)了細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)狀態(tài)的變化,增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果的可信度和說服力。
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https://doi.org/10.1002/jgm.70038
德國(guó)InnoME公司研發(fā)的zenCell owl活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像及分析系統(tǒng),提供了一種創(chuàng)新的解決方案。
* 基于非標(biāo)記、非侵入的方式,能夠在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)工作
* 24 個(gè)獨(dú)立通道設(shè)計(jì),便于多組對(duì)比及相應(yīng)復(fù)孔
* 提供高質(zhì)量的圖像、視頻、統(tǒng)計(jì)學(xué)曲線和定量數(shù)據(jù)
* 實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖/增殖抑制、細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)控/培養(yǎng)優(yōu)化、遷移/侵襲、吞噬/殺傷等諸多活細(xì)胞動(dòng)態(tài)過程的監(jiān)測(cè)
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