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HyClone VaccineXpress無(wú)血清培養(yǎng)基在病毒疫苗研發(fā)量產(chǎn)中的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):376 發(fā)布日期:2025-12-26  來(lái)源:思拓凡Cytiva
隨著生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和生命科學(xué)基礎(chǔ)研究對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模、效率和安全性能要求的不斷擴(kuò)大和提高,無(wú)血清培養(yǎng)基的研制和開(kāi)發(fā)已經(jīng)成為細(xì)胞工程領(lǐng)域的重要課題。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展已有60多年的歷史,其中經(jīng)典培養(yǎng)基( Classical Media,CM)主要是指20世紀(jì)五六十年代一些公開(kāi)配方的傳統(tǒng)培養(yǎng)基,如MEM、M199、DMEM、RPMI1640、DMEM/F12等,此類培養(yǎng)基需要配合10%左右的牛血清才能使用。由于牛血清成分復(fù)雜、批次間差異較大,培養(yǎng)過(guò)程中有外源物污染的風(fēng)險(xiǎn),因此科學(xué)家們一直致力于研究牛血清替代物,研發(fā)無(wú)血清培養(yǎng)基。

無(wú)血清培養(yǎng)基的發(fā)展歷經(jīng)了無(wú)血清來(lái)源、無(wú)動(dòng)物源、無(wú)蛋白和化學(xué)成分限定培養(yǎng)基等4個(gè)階段,逐步使得無(wú)血清培養(yǎng)基的成分更為明確和簡(jiǎn)單,進(jìn)一步提升了無(wú)血清培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中可避免外源物污染等優(yōu)勢(shì),使其在生物制品和生命科學(xué)領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用和發(fā)展。

無(wú)血清培養(yǎng)基在病毒疫苗細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái)的應(yīng)用

自2020年以來(lái),新型冠狀病毒肺炎在世界范圍內(nèi)爆發(fā)和流行,嚴(yán)重威脅了人類的生命健康,而病毒疫苗的研發(fā)和使用是應(yīng)對(duì)病毒傳播和流行的重要手段。傳統(tǒng)疫苗領(lǐng)域使用經(jīng)典培養(yǎng)基添加牛血清生產(chǎn)疫苗,血清成分復(fù)雜性和外源污染帶來(lái)的潛在風(fēng)險(xiǎn),而無(wú)血清培養(yǎng)基可以完美解決病毒疫苗中的血清問(wèn)題。在病毒疫苗規(guī);囵B(yǎng)中,無(wú)血清培養(yǎng)的關(guān)鍵是設(shè)計(jì)符合細(xì)胞貼壁特性和高細(xì)胞密度的無(wú)血清培養(yǎng)基。疫苗生產(chǎn)使用的無(wú)血清培養(yǎng)基HyClone VaccineXpress適用于貼壁細(xì)胞依賴性腎源細(xì)胞系(Vero細(xì)胞)的高密度生長(zhǎng)和維持,目前已廣泛應(yīng)用于生產(chǎn),如流感(Influenza)、寨卡(Zika)、脊灰(Polio)、登革熱(Dengue)和呼吸道合胞體病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)等多種病毒類疫苗。

傳統(tǒng)的病毒疫苗 — Vero細(xì)胞3D微載體貼壁轉(zhuǎn)懸浮培養(yǎng)工藝

傳統(tǒng)的病毒疫苗包括滅活的病毒疫苗和減毒活疫苗。在人用病毒疫苗宿主細(xì)胞的選擇中,有原代細(xì)胞,人二倍體細(xì)胞 (MRC-5, 2BS等) ,傳代細(xì)胞( Vero,MDCK等) 。其中Vero細(xì)胞系是世界衛(wèi)生組織(WHO)和我國(guó)生物制品規(guī)程推薦的人用疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系,被⼴泛⽤于⽣產(chǎn)狂⽝病毒疫苗、輪狀病毒活疫苗、流感疫苗活疫苗等多種疫苗的生產(chǎn)。

目前已知 Vero 細(xì)胞是新冠病毒最敏感的細(xì)胞之一,可以作為新冠病毒滅活疫苗的宿主細(xì)胞的選擇之一。Vero細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,常使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)或使用微載體在生物反應(yīng)器中培養(yǎng),在培養(yǎng)基中添加牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)方式。

該應(yīng)用案例中我們介紹一種無(wú)動(dòng)物源成分的輪狀病毒生產(chǎn)方法, 即采用Vero細(xì)胞結(jié)合HyClone VaccineXpress 無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)、接毒到收獲的過(guò)程。過(guò)程中采用先進(jìn)封閉的一次性生物反應(yīng)器技術(shù),結(jié)合預(yù)滅菌的微載體Cytodex 1 Gamma,Vero 細(xì)胞密度達(dá)到106 cells/ml.同時(shí)過(guò)程中詳細(xì)比較了一次性生物反應(yīng)器和Spinner flask中Vero 細(xì)胞的密度和形態(tài)。

特別要指出VaccineXpress培養(yǎng)基在輪狀病毒培養(yǎng)方面,產(chǎn)毒滴度上有明顯優(yōu)勢(shì)。下圖為輪狀病毒在VaccineXpress和對(duì)照培養(yǎng)基中的產(chǎn)毒情況,結(jié)果顯示:輪狀病毒在Vero細(xì)胞微載體(Cytodex 1 Gamma)貼壁培養(yǎng)工藝中,VaccineXpress展現(xiàn)出優(yōu)異的產(chǎn)毒表現(xiàn)。接毒后,通過(guò)重組胰蛋白酶激活,病毒滴度達(dá)到8 x 105 FFU以上。

微載體培養(yǎng)是目前共認(rèn)的最具有發(fā)展前途的一種動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù),其兼具貼壁細(xì)胞貼壁的本性和懸浮大規(guī)模線性放大的優(yōu)勢(shì)。Cytiva HyClone的微載體Cytodex & Cytopore類型的微載體廣泛應(yīng)用在疫苗、單抗、基因治療病毒載體等生物制品的大規(guī)模生產(chǎn)中。同時(shí)基于對(duì)活疫苗生產(chǎn)的無(wú)動(dòng)物源性成分 (ADCF) 細(xì)胞培養(yǎng)基的需求量,HyClone開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證了VaccineXpress 培養(yǎng)基用于病毒疫苗開(kāi)發(fā),可用于貼壁細(xì)胞系高密度生長(zhǎng)和維持。該培養(yǎng)基不含血清和動(dòng)物源性組分。此外,VaccineXpress 的化學(xué)配方提高了可重現(xiàn)性,同時(shí)簡(jiǎn)化了生物工藝應(yīng)用中重組蛋白和病毒的下游純化步驟。

Cytiva(思拓凡)——HyClone VaccineXpress 細(xì)胞培養(yǎng)基

HyClone VaccineXpress 細(xì)胞培養(yǎng)基可以促進(jìn)腎源性細(xì)胞系(例如 Vero 細(xì)胞)的高密度生長(zhǎng)和維持,適用于疫苗開(kāi)發(fā)領(lǐng)域。VaccineXpress 培養(yǎng)基非常適合利用微載體在多孔板以及 WAVE 生物反應(yīng)袋或 Xcellerex 生物反應(yīng)袋中大規(guī)模生產(chǎn)。

● 無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物源性成分的制劑

● 支持直接或連續(xù)馴化、細(xì)胞生長(zhǎng)和病毒繁殖

● 支持高細(xì)胞密度、病毒感染活性和高生產(chǎn)率

● 適用于多種病毒應(yīng)用(例如流感病毒、輪狀病毒、RSV、登革熱病毒、寨卡病毒)

● 適用于使用微載體的小規(guī)模到大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用

● 提供液體和粉末兩種形式的制劑

HyClone VaccineXpress 培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)驗(yàn)證,使用微載體培養(yǎng)貼壁 Vero 細(xì)胞,適用于生產(chǎn)病毒疫苗。此培養(yǎng)基中不含血清和動(dòng)物源性成分,可以減小差異,提高工藝放大能力,純化重組蛋白和病毒。VaccineXpress 的配方不含 L-谷氨酰胺,可延長(zhǎng)保質(zhì)期。

綜上所述,Cytiva(思拓凡)旗下的HyClone VaccineXpress無(wú)血清培養(yǎng)基,憑借無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物源性成分的核心優(yōu)勢(shì),完美適配流感、登革熱等多種病毒疫苗的研發(fā)與量產(chǎn)需求。它不僅能支持Vero細(xì)胞等疫苗生產(chǎn)常用貼壁細(xì)胞的高密度生長(zhǎng),還能顯著提升病毒產(chǎn)毒滴度,同時(shí)簡(jiǎn)化下游純化流程、提高工藝重現(xiàn)性,有效規(guī)避了傳統(tǒng)含血清培養(yǎng)基的外源污染與批次差異問(wèn)題。無(wú)論是實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段的小規(guī)模培養(yǎng),還是工業(yè)化量產(chǎn)中的大規(guī)模放大,該培養(yǎng)基都能通過(guò)液體或粉末兩種制劑形式靈活適配,結(jié)合微載體培養(yǎng)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)高效穩(wěn)定的疫苗生產(chǎn)。因此,HyClone VaccineXpress無(wú)疑是流感、登革熱等病毒疫苗研發(fā)與量產(chǎn)的優(yōu)選細(xì)胞培養(yǎng)基,為生物醫(yī)藥領(lǐng)域的疫苗生產(chǎn)提供了可靠的技術(shù)支撐。

發(fā)布者:Cytiva(思拓凡)
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