食果糖乳桿菌的培養(yǎng)方法與注意事項及打管說明！

                                    食果糖乳桿菌的培養(yǎng)方法與注意事項及打管說明！
 
 
食果糖乳桿菌， 桿菌,0.5—0.8×1.5—4微米,單個、成對常彎曲或卷曲成長度不一的絲鏈形。異型發(fā)酵。從果糖產(chǎn)酸和氣；在葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、菊糖和L-蘋果酸鹽中發(fā)酵可變,緩慢或陰性；不發(fā)酵阿拉伯糖、木糖、核糖、檸檬酸鹽和四十五種其它碳水化合物和多元醇。
 
一、菌種簡介
平臺編號：Bio-03604
提供形式：凍干物
拉丁屬名：Lactobacillus Fructivorans
中文譯名：食果糖乳桿菌
規(guī)格：鑒定為Lentilactobacillus Parabuchneri
拉丁學(xué)名：Lactobacillus fructivorans
原始編號：IFFI 6052
菌株來源：←中國食品發(fā)酵工業(yè)科學(xué)研究所
保藏人：周宇光
直接來源國家：中國
保藏時間：11/30/1999
其他保藏編號：
生物危害：四類
模式菌株：非模式菌株
培養(yǎng)溫度：30℃
培養(yǎng)基：0006    
用途：研究
注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
 
二、儲存條件
凍干菌種和試管斜面請置于 6-10℃冷藏。
 
三、培養(yǎng)基
MRS 培養(yǎng)基
酪蛋白胨 10 克 牛肉膏 10 克
酵母提取液 5.0 克 葡萄糖 20 克
乙酸鈉 5.0 克 檸檬酸二胺 2.0 克
吐溫 80 1.0 克 磷酸氫二鉀 2.0 克
七水硫酸鎂 0.2 克 七水硫酸錳 0.05 克
碳酸鈣 20.0 克 瓊脂 20.0 克
蒸餾水 1.0 升 PH 6.8
如果要配制液體培養(yǎng)基，則不用加入碳酸鈣和瓊脂
 
四、注意事項
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間：細(xì)菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前，建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，延遲期較長，如在說明建議的培養(yǎng)時間還未長起來，請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間，直至菌種培養(yǎng)完成，有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長，一般來說菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
3、初次使用時請嚴(yán)格按照本說明書推薦條件和操作步驟進行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時，在操作過程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件：制作培養(yǎng)基時，應(yīng)使用厭氧螺口試管，并利用高純氮氣去除試管和培養(yǎng)基中的氧氣，使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站。
 
五、凍干管打管說明書
1、安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂（應(yīng)避免過多水蒸氣影響菌種的復(fù)蘇），用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、用無菌吸管吸取 0.3ml（建議勿超過 0.5ml）適宜的液體培養(yǎng)基(不添加瓊脂)，滴入管內(nèi)，輕輕振蕩，待安瓿管內(nèi)的菌體溶解呈懸浮狀，在用無菌吸管吸取全部菌懸液接在 1-2 支建議的培養(yǎng)基試管中（不超過 2 支，中國微生物菌種查詢網(wǎng)提供的培養(yǎng)基配方中有瓊脂，請務(wù)必做成試管斜面，配方中沒有瓊脂，試管中液體培養(yǎng)基不超過 5ml），并在建議的條件下靜止培養(yǎng)。
3、凍干管打開后需一次用完，不能留存。另外，安瓿管內(nèi)大部分是用牛奶做保護劑，里面菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時要全部菌懸液接在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。
4、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護眼睛。
5、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
6、菌種復(fù)蘇時，請務(wù)必記錄好菌種的編號和制備批號，如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請在收到菌鐘后 2 個月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理。
 
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