VSV-G同源性G蛋白序列作為In vivo CAR-T遞送包膜的效率及特異性

文章來源公眾號：IMMUNO隨筆                 作者：免疫背包客

GigaMune公司通過生物信息學(xué)手段搜索比對到了166個與VSV-G具有同源性的G蛋白序列，隨意從中挑選了9種序列作為慢病毒載體的包膜蛋白，并測試不同包膜遞送載體的效率、特異性和對不同靶細(xì)胞的敏感性。

166個G蛋白在氨基酸上與VSV-G同源性介于17.3% ~ 99.4%之間，平均57.5%，中位數(shù)49.1%。而隨意挑選的9種序列與VSV-G的同源性介于26%-85%之間。

值得注意的是，只有同源性為85%的候選I序列保留了H8, K47, R354三個氨基酸，這三個氨基酸是VSV-G與LDL-R結(jié)合所必須的，突變后喪失與LDL-R的結(jié)合，這也是目前in vivo CAR-T開發(fā)經(jīng)常采用的突變方式。

有趣的是，盡管相似性甚至低至26%，但是結(jié)構(gòu)與VSV-G具有極高的相似性。

體外初步研究發(fā)現(xiàn)不同包膜蛋白的轉(zhuǎn)染效率是不同的，以CD3靶向性為例，相比于候選A和B，候選C對T細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)染效率。

整體的轉(zhuǎn)染效率、敏感性和特異性pattern如下：

利用候選C包膜和CD3靶向性制備的CAR遞送系統(tǒng)在小鼠體內(nèi)可以很好的生成CAR-T并殺傷腫瘤。

該研究為遞送載體的包膜選擇提供了更多的替代策略，例如一旦人體對初次治療的VSV-G遞送系統(tǒng)產(chǎn)生抗藥性，基于VSV-G低相似性的包膜蛋白可能提供二次治療機(jī)會。​