Co-IP助力揭示Rictor蛋白通過調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善ABMR的分子機(jī)制
在腎移植領(lǐng)域，抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)（ABMR）是導(dǎo)致長(zhǎng)期移植物失敗的 “頭號(hào)殺手”。盡管臨床已有多種干預(yù)手段，但 ABMR 的高復(fù)發(fā)率和差預(yù)后仍未得到根本解決 —— 直到近期《Advanced Science》（2025, 12, e17119）發(fā)表的一項(xiàng)突破性研究，首次揭示了 Rictor 蛋白通過調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善 ABMR 的分子機(jī)制，為新療法開發(fā)提供了關(guān)鍵靶點(diǎn)。而這項(xiàng)研究的核心分子互作驗(yàn)證，正是借助了 Absin 免疫共沉淀（Co-IP）試劑盒（貨號(hào)：abs955）的高效支撐。
文獻(xiàn)標(biāo)題：Rictor Ameliorates Acute Antibody-Mediated Rejection Following Kidney Transplantation by Suppressing Macrophage M1 Polarization Through p65-NLRP3 Axis
發(fā)表期刊：Advanced Science（IF 14.1）
DOI：https://doi.org/10.1002/advs.202417119
核心試劑： 免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒（abs955）
一、文獻(xiàn)核心發(fā)現(xiàn)：Rictor 是 ABMR 的 “保護(hù)因子”
這項(xiàng)研究圍繞 “腎移植 ABMR 中巨噬細(xì)胞的作用” 展開，最終得出三大關(guān)鍵結(jié)論：
1. M1 巨噬細(xì)胞是 ABMR 的 “助推器”：ABMR 移植物中 M1 型巨噬細(xì)胞（促炎表型）大量浸潤(rùn)，其數(shù)量與移植物損傷程度正相關(guān)；
2. Rictor 蛋白是 “剎車鍵”：ABMR 移植物中巨噬細(xì)胞的 Rictor 表達(dá)顯著升高，若特異性敲除巨噬細(xì)胞的 Rictor，會(huì)加劇移植物損傷、縮短存活時(shí)間；
3. 分子機(jī)制：Rictor-p65-NLRP3 軸：Rictor 通過上調(diào) E3 泛素連接酶 SOCS1，促進(jìn) p65 蛋白的 K48 型泛素化降解，進(jìn)而抑制 NLRP3 炎癥小體激活，最終減少 M1 巨噬細(xì)胞極化。
二、Absin 產(chǎn)品助力：abs955 試劑盒破解 “蛋白互作” 關(guān)鍵證據(jù)
在解析 “Rictor 如何調(diào)控 p65 泛素化” 這一核心機(jī)制時(shí)，免疫共沉淀（Co-IP）實(shí)驗(yàn)是不可或缺的技術(shù)手段 —— 而研究團(tuán)隊(duì)正是使用 Absin 的 Co-IP 試劑盒（貨號(hào)：abs955），成功捕獲了關(guān)鍵蛋白復(fù)合物，為機(jī)制驗(yàn)證提供了直接證據(jù)。
1. abs955 試劑盒的核心應(yīng)用場(chǎng)景
研究中，團(tuán)隊(duì)需要明確三個(gè)關(guān)鍵問題：Rictor 是否影響 p65 的泛素化？是哪種類型的泛素化（K48/K63）？SOCS1 是否參與這一過程？這三個(gè)問題的答案，均依賴 abs955 試劑盒完成的 Co-IP 實(shí)驗(yàn)：
驗(yàn)證 Rictor 促進(jìn) p65 泛素化：
團(tuán)隊(duì)用 abs955 試劑盒，在過表達(dá) Rictor 的 HEK293T 細(xì)胞中進(jìn)行 Co-IP 實(shí)驗(yàn)，以 HA 標(biāo)簽抗體捕獲 p65 蛋白，再用泛素抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示：Rictor 過表達(dá)組的 p65 泛素化水平顯著高于對(duì)照組，證明 Rictor 可增強(qiáng) p65 的泛素化修飾。
明確泛素化類型為 K48 型：
進(jìn)一步用 abs955 試劑盒，分別檢測(cè) K48 和 K63 型泛素化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：Rictor 僅促進(jìn) p65 的 K48 型泛素化（蛋白降解信號(hào)），對(duì) K63 型無影響 —— 這解釋了為何 Rictor 能減少 p65 蛋白總量，進(jìn)而抑制 NF-κB 通路。
證實(shí) SOCS1 是關(guān)鍵中介：
為驗(yàn)證 SOCS1 是否介導(dǎo) Rictor 對(duì) p65 的泛素化，團(tuán)隊(duì)用 siRNA 敲低 SOCS1 后，再通過 abs955 試劑盒進(jìn)行 Co-IP。結(jié)果顯示：敲低 SOCS1 后，Rictor 對(duì) p65 的 K48 泛素化促進(jìn)作用完全消失，直接證明 SOCS1 是 Rictor 調(diào)控 p65 降解的 “橋梁”。
2. abs955 試劑盒的技術(shù)優(yōu)勢(shì)作為專為蛋白互作實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的試劑盒，abs955 能成為研究 “得力助手”，源于其三大核心特性：
· 高效捕獲蛋白復(fù)合物：試劑盒中的 Protein A/G 磁珠具有高親和力，可特異性結(jié)合抗體 - 抗原復(fù)合物，減少非特異性吸附，確保低豐度蛋白互作也能被檢測(cè)到；
· 兼容多種樣本類型：無論是 HEK293T 細(xì)胞還是原代骨髓巨噬細(xì)胞（BMDMs），abs955 均能穩(wěn)定提取蛋白復(fù)合物，適配研究中不同細(xì)胞模型的需求；
· 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性強(qiáng)：試劑盒提供完整的裂解液、洗滌液和對(duì)照試劑，標(biāo)準(zhǔn)化流程降低操作誤差 —— 這也是研究團(tuán)隊(duì)能多次重復(fù)驗(yàn)證泛素化結(jié)果的關(guān)鍵。
從基礎(chǔ)機(jī)制研究到靶點(diǎn)驗(yàn)證，Absin 始終以 “高品質(zhì)試劑 + 專業(yè)技術(shù)支持”，幫助科研團(tuán)隊(duì)突破實(shí)驗(yàn)瓶頸 —— 正如本次研究，abs955 試劑盒不僅為 Rictor-p65-NLRP3 軸的驗(yàn)證提供了直接證據(jù)，更為 ABMR 治療新靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。
未來，Absin 將繼續(xù)聚焦免疫、腫瘤、神經(jīng)等領(lǐng)域的研究需求，開發(fā)更多適配前沿技術(shù)的試劑，為人類健康事業(yè)貢獻(xiàn)力量！
文中使用產(chǎn)品
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs955 | 免疫共沉淀（Co-IP）試劑盒 | - |
ChIP技術(shù)
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs50034 | 染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)試劑盒 | 22T |
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs50074 | DNA Pull Down Kit(Animal) | 6T |
| abs50073 | DNA Pull Down Kit(Plant and Bacteria) | 6T |
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs50071 | RNA免疫共沉淀(RIP)試劑盒 | 6T/12T |
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs50072 | RNA Pull Down Kit | 6T |
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs50082 | GST Pull Down Kit | 6T |
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