免疫沉淀(IP/CoIP)試劑盒助力開發(fā)SIRPα-M@nanoPB突破骨肉瘤治療困局

骨肉瘤作為青少年高發(fā)的惡性骨腫瘤，術(shù)后復(fù)發(fā)率高、轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)大，傳統(tǒng)治療手段難以兼顧療效與正常組織保護(hù)。近期，來(lái)自廣東省人民醫(yī)院、清華大學(xué)等單位的研究團(tuán)隊(duì)在《Bioactive Materials》發(fā)表重磅成果，開發(fā)出靶向 CD47-SIRPα 軸的工程化巨噬細(xì)胞納米顆粒 SIRPα-M@nanoPB，實(shí)現(xiàn)微波消融與免疫調(diào)節(jié)的協(xié)同治療，為骨肉瘤治療提供了全新思路。而 Absin 的核心產(chǎn)品，正是這場(chǎng)科研突破中驗(yàn)證關(guān)鍵機(jī)制的 “幕后功臣”。

文獻(xiàn)標(biāo)題：Engineered macrophage nanoparticles enhance microwave ablation efficacy in osteosarcoma via targeting the CD47-SIRPα Axis: A novel Biomimetic immunotherapeutic approach
發(fā)表期刊：Bioactive Materials（IF 20.3）
DOI：https://doi.org/10.1016/j.bioactmat.2025.01.012
核心試劑：免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒（abs955）

• 骨肉瘤術(shù)后殘留微小病灶易復(fù)發(fā)，微波消融對(duì)正常組織損傷大；
• 腫瘤微環(huán)境中 M2 型巨噬細(xì)胞抑制免疫，CD47-SIRPα 軸介導(dǎo)的 “別吃我” 信號(hào)讓腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視；
• 傳統(tǒng)納米材料靶向性差、生物相容性不足。

• 以微波響應(yīng)性納米普魯士藍(lán)（nanoPB）為核心，實(shí)現(xiàn)靶向熱療與活性氧（ROS）生成；
• 采用基因工程改造的 M1 型巨噬細(xì)胞膜包裹 nanoPB，膜上穩(wěn)定過表達(dá) SIRPα 蛋白；
• 雙重作用機(jī)制：① 微波照射下 nanoPB 產(chǎn)生熱療 + ROS 殺傷腫瘤細(xì)胞；② SIRPα 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合腫瘤細(xì)胞 CD47，阻斷 “別吃我” 信號(hào)，恢復(fù) M1 巨噬細(xì)胞吞噬功能，激活全身抗腫瘤免疫。

圖：研究設(shè)計(jì)示意圖（對(duì)應(yīng)原文Schema 1）

圖1：SIRPα-M@nanoPB物理表征（對(duì)應(yīng)原文圖1：A為膜包裹示意圖，B為元素分布，C為TEM形貌，D為粒徑分布，E-F驗(yàn)證膜蛋白保留，G為FTIR光譜）

• 體外：SIRPα-M@nanoPB 在 10W 微波照射下可快速升溫，且能重復(fù)產(chǎn)熱；同時(shí)高效生成 ROS，對(duì)骨肉瘤 K7M2 細(xì)胞的殺傷率顯著高于單純 nanoPB（圖 2H）；
• 體內(nèi)：腫瘤部位靶向升溫，熱損傷僅局限于腫瘤組織，避免正常組織受損（圖 2D-E）。

圖2：微波響應(yīng)性驗(yàn)證（對(duì)應(yīng)原文圖2：A-B為體外升溫曲線，D-E為體內(nèi)熱成像，H為細(xì)胞內(nèi)ROS生成熒光圖）

• 靶向結(jié)合驗(yàn)證：SIRPα 與腫瘤細(xì)胞 CD47 特異性結(jié)合（圖 4A-B），阻斷 “別吃我” 信號(hào)；
• 吞噬功能恢復(fù)：M1 巨噬細(xì)胞對(duì) K7M2 細(xì)胞的吞噬率提升 3 倍以上（圖 4C-E）；
• 體內(nèi)免疫激活：腫瘤組織中 M1/M2 巨噬細(xì)胞比例顯著升高，CD8+ 殺傷性 T 細(xì)胞大量浸潤(rùn)（圖 7-8）。

圖3：免疫機(jī)制驗(yàn)證（對(duì)應(yīng)原文圖4：A為免疫熒光共定位，B為CoIP驗(yàn)證相互作用，C-E為吞噬實(shí)驗(yàn)結(jié)果）

• 原發(fā)腫瘤模型：SIRPα-M@nanoPB + 微波組腫瘤生長(zhǎng)抑制率達(dá) 70% 以上；
• 殘留腫瘤模型：實(shí)現(xiàn)腫瘤完全根除，且骨缺損部位出現(xiàn)再生修復(fù)（圖 6G-H）；
• 生物相容性：對(duì)心、肝、脾、肺、腎等主要器官無(wú)明顯損傷。

圖4：體內(nèi)治療效果（對(duì)應(yīng)原文圖6：E為殘留腫瘤生長(zhǎng)曲線，G為Micro-CT骨修復(fù)圖，H為H&E染色驗(yàn)證）

1. 將 SIRPα-M 納米顆粒與 K7M2 細(xì)胞共孵育；
2. 用 Absin 的 IP 試劑盒裂解細(xì)胞，加入抗 SIRPα 抗體進(jìn)行免疫沉淀；
3. 通過 Protein A/G Beads 捕獲免疫復(fù)合物，Western blot 檢測(cè)到 CD47 的存在（原文圖 4B）。

圖：CoIP驗(yàn)證結(jié)果（對(duì)應(yīng)原文圖4B：IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)SIRPα可成功捕獲CD47，證明兩者特異性相互作用）

• 特異性強(qiáng)：Protein A/G Beads 高效捕獲抗體 - 抗原復(fù)合物，減少非特異性結(jié)合；
• 穩(wěn)定性高：IP 試劑盒組分優(yōu)化，確保蛋白相互作用不被破壞；
• 結(jié)果可靠：為 “阻斷 CD47-SIRPα 軸” 這一核心機(jī)制提供了直接的實(shí)驗(yàn)證據(jù)，是后續(xù)所有免疫調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。