BIOSPOT DX精準(zhǔn)納升點樣平臺助力血型基因分型高效精準(zhǔn)檢測
研究背景
在臨床輸血安全、個性化醫(yī)療等關(guān)鍵場景中，血型基因分型是重要的前置環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)分型技術(shù)如血清學(xué)操作或分子生物學(xué)方法，耗時費力、對設(shè)備和人員要求嚴(yán)苛，存在手動操作變異性大、規(guī)模化應(yīng)用難等問題，難以匹配即時診斷（POCT）的臨床需求。
Biofluidix公司發(fā)布了一份新的BIOSPOT DX 精準(zhǔn)納升點樣平臺應(yīng)用指南，利用等位基因特異性的多重側(cè)向流檢測（LFA）技術(shù)，對Kidd、Duffy、MNS 三大血型系統(tǒng)的 7 個關(guān)鍵等位基因分型。LATE-PCR 擴增技術(shù)與自動化點樣方案的融合，實現(xiàn)“無需 DNA 提取、無需專業(yè)解讀”，提高了檢測效率，減少了人為誤差和實際損耗。
圖1 LFA 膜生產(chǎn)的 BIOSPOT® DX 精準(zhǔn)納升點樣平臺
實 驗 流 程
01試劑與組件準(zhǔn)備
準(zhǔn)備寡核苷酸探針、生物素化牛血清白蛋白（BSA）、點樣緩沖液、運行緩沖液、抗生物素抗體偶聯(lián)金納米顆粒等關(guān)鍵試劑，組裝包含硝酸纖維素膜的干試劑試紙條。
02BIOSPOT DX精準(zhǔn)納升點樣平臺的點樣流程
1.底物固定：將硝酸纖維素膜放置于真空平臺上固定，確保點樣全程無移位，保障陣列位置一致性；
2.參數(shù)配置：設(shè)定 “每條檢測條 2×5 陣列” 的點樣模式，啟用 8 通道并行操作，單次運行可生成 50 個 LFA 檢測矩陣；正式點樣前，通過 SmartDrop技術(shù)自動校準(zhǔn)液滴至每滴50nL，實現(xiàn)精準(zhǔn)點樣；
3.自動化點樣：按預(yù)設(shè)程序依次完成捕獲探針與對照探針的非接觸式點樣，點樣間隙自動執(zhí)行 3 次管道清洗，杜絕交叉污染（圖2）；
4.后續(xù)處理：點樣完成后，將覆膜芯片轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱干燥，穩(wěn)定試劑活性。
圖2 通過 BIOSPOT DX 精準(zhǔn)納升點樣平臺以 50 納升體積點樣。每個 2×5 陣列包含 10 個液滴（8 個寡核苷酸探針 [1-8] 和 2 個 BSA 對照 [9]）。
03擴增與檢測
以全血為直接模板進行 LATE-PCR 擴增，生成生物素標(biāo)記的單鏈 DNA；將擴增產(chǎn)物加入干試劑試紙條，經(jīng)恒溫雜交后，通過抗生物素金納米顆粒結(jié)合形成清晰紅點，實現(xiàn)等位基因可視化檢測（圖3）。
圖3：LFA 基因分型檢測流程示意圖：(1) 側(cè)向流檢測條結(jié)構(gòu)示意圖；(2) 通過 LATE-PCR 進行 DNA 擴增；(3) 試紙條加樣；(4) 與捕獲探針雜交；(5) 紅點可視化檢測。
研究結(jié)論
1. 檢測精度高：對 5 份經(jīng)倫理批準(zhǔn)的獻(xiàn)血者樣本驗證顯示，7 個目標(biāo)等位基因分型結(jié)果與參考數(shù)據(jù) 100% 吻合，紅點信號清晰、特異性強，無需專業(yè)人員即可判讀（圖4）；
2. 自動化優(yōu)勢明顯：BIOSPOT® DX 的多通道非接觸式技術(shù)，徹底擺脫手動操作依賴，單次運行可實現(xiàn) 50 條檢測條 “無人值守” 生產(chǎn)，減少人為誤差又大幅提升檢測通量；
3. 實用價值突出：小體積點樣設(shè)計節(jié)省試劑用量，自動清洗流程保障無污染操作；平臺兼容核酸與蛋白試劑，適配多種檢測格式，完美支撐從原型開發(fā)到規(guī)模化生產(chǎn)的全流程；
4. 應(yīng)用前景廣闊：為血型 SNP 檢測等即時基因分型場景提供 “精準(zhǔn)、高效、低成本” 的一體化解決方案，為臨床輸血安全、個性化診斷提供堅實技術(shù)支撐。
圖4：不同基因型的特異性雜交信號示例檢測條。5 份樣本均與預(yù)期分型結(jié)果匹配，符合率達(dá) 100%。
作為多重側(cè)向流檢測的核心驅(qū)動力，BIOSPOT DX 平臺以納升級精準(zhǔn)、模塊化設(shè)計與全自動化流程，重新定義了基因分型檢測的開發(fā)與生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，成為分子診斷領(lǐng)域技術(shù)革新的優(yōu)選伙伴！
Biofluidix成立于2005年，位于德國，技術(shù)源自德國弗萊堡大學(xué)微量系統(tǒng)工程學(xué)院。
*專注非接觸式的精準(zhǔn)納升和皮升的超微量點樣和分液；
*點樣噴頭可第三方自動化整合；
*提供微量分液、芯片點樣設(shè)備與定制化服務(wù)；
*用于微孔板微量移液、微流控快檢芯片、生物傳感器芯片、電化學(xué)芯片、光電芯片以及微陣列生物芯片，包括：核酸芯片，基因芯片，蛋白芯片，多肽芯片、多糖芯片、小分子化合物芯片、細(xì)胞芯片。
