HRP標(biāo)記二抗助力揭示LCN2與TWEAK協(xié)同促進(jìn)銀屑病進(jìn)展新機(jī)制研究

銀屑病作為影響全球超 6000 萬(wàn)人的慢性炎癥性皮膚病，其角質(zhì)形成細(xì)胞異常增殖、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)的核心機(jī)制仍待深入挖掘。近日，《Cellular & Molecular Immunology》（2025, 22:760–775）發(fā)表了一項(xiàng)突破性研究，揭示了脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 2（LCN2）與腫瘤壞死因子樣弱凋亡誘導(dǎo)因子（TWEAK）通過(guò) Fn14 受體協(xié)同促進(jìn)銀屑病進(jìn)展的全新機(jī)制。在這項(xiàng)高質(zhì)量研究中，Absin 的 HRP 標(biāo)記二抗為蛋白表達(dá)檢測(cè)提供了可靠支持，助力科研團(tuán)隊(duì)解鎖銀屑病發(fā)病的關(guān)鍵調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

文獻(xiàn)標(biāo)題：Synergistic effects of LCN2 and TWEAK on the progression of psoriasis
發(fā)表期刊：Cellular & Molecular Immunology（IF 19.8）
DOI：https://doi.org/10.1038/s41423-025-01292-9
核心試劑：Goat anti-Rabbit IgG-HRP Antibody

1. 第一步：臨床樣本 + 公共數(shù)據(jù)，鎖定三者表達(dá)相關(guān)性
研究首先通過(guò)銀屑病患者皮膚 / 血清樣本（n=7 皮膚，n=12 血清）與健康對(duì)照（n=4 皮膚，n=10 血清）對(duì)比，結(jié)合公共單細(xì)胞 RNA 測(cè)序（scRNA-seq）數(shù)據(jù)（Cheng et al.、Reynolds et al.），發(fā)現(xiàn)銀屑病病灶中 LCN2、TWEAK、Fn14 表達(dá)顯著升高，且在咪喹莫特（IMQ）誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型中驗(yàn)證了這一趨勢(shì)。

2. 第二步：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證分子間直接作用與功能
為明確三者的相互作用，團(tuán)隊(duì)通過(guò)：

• 表面等離子體共振（SPR）+ 免疫共沉淀（Co-IP）：直接證實(shí) LCN2 與 Fn14 存在特異性結(jié)合；
• 細(xì)胞刺激實(shí)驗(yàn)：分別在角質(zhì)形成細(xì)胞（HFKs、HaCaT）、巨噬細(xì)胞（J774A.1）、中性粒細(xì)胞中探究 LCN2/TWEAK 的功能，例如 LCN2 促進(jìn)巨噬細(xì)胞 M1 分化、TWEAK 上調(diào)中性粒細(xì)胞 LCN2 等。

3. 第三步：基因敲除小鼠，體內(nèi)驗(yàn)證關(guān)鍵分子必要性
團(tuán)隊(duì)構(gòu)建 Lcn2⁻/⁻、Fn14⁻/⁻基因敲除小鼠，結(jié)合 IMQ 誘導(dǎo)模型，觀察到：

• Lcn2⁻/⁻小鼠皮膚紅斑、脫屑減輕，角質(zhì)形成細(xì)胞增殖標(biāo)志物（KRT5、KRT14）下調(diào)；
• Fn14⁻/⁻小鼠可阻斷 LCN2 與 TWEAK 的促表皮增生作用，MAPK 通路激活減弱。

4. 第四步：組學(xué)分析，挖掘下游調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
通過(guò) bulk RNA-seq（角質(zhì)形成細(xì)胞、敲除小鼠皮膚）和 iTRAQ 蛋白組學(xué)，進(jìn)一步確認(rèn) LCN2-TWEAK-Fn14 軸可協(xié)同激活炎癥因子（IL-6、IL-23A）、趨化因子（CXCL5、CCL2）及 MAPK 通路，為機(jī)制提供轉(zhuǎn)錄組 / 蛋白組層面證據(jù)。

核心成果	關(guān)鍵證據(jù)	圖片
LCN2 與 Fn14 直接結(jié)合，是協(xié)同作用的 “分子基礎(chǔ)”	SPR 顯示兩者特異性結(jié)合，Co-IP 驗(yàn)證相互作用
LCN2 雙向調(diào)控炎癥細(xì)胞：促巨噬細(xì)胞 M1 分化 + 角質(zhì)形成細(xì)胞炎癥	LCN2 刺激后，巨噬細(xì)胞 iNOS（M1 標(biāo)志物）升高、TWEAK 分泌增加；角質(zhì)形成細(xì)胞 p-ERK1/2 激活
TWEAK 反向上調(diào)中性粒細(xì)胞 LCN2，形成局部 “炎癥放大環(huán)”	TWEAK 刺激后，小鼠中性粒細(xì)胞 LCN2 mRNA 及分泌量顯著增加
LCN2+TWEAK 協(xié)同增強(qiáng)角質(zhì)形成細(xì)胞炎癥反應(yīng)	共刺激后，IL-6、CXCL10 等炎癥因子表達(dá)量遠(yuǎn)高于單獨(dú)刺激，MAPK 通路激活更顯著
Lcn2/Fn14 敲除可緩解銀屑病癥狀	Lcn2⁻/⁻小鼠血清 TWEAK 降低、表皮厚度變��；Fn14⁻/⁻小鼠 KRT5/KRT14 表達(dá)下調(diào)

1. 場(chǎng)景 1：巨噬細(xì)胞功能驗(yàn)證 —— 捕捉 TWEAK/Fn14 表達(dá)變化
研究團(tuán)隊(duì)在 J774A.1 巨噬細(xì)胞中檢測(cè) LCN2 刺激后 Fn14、TWEAK、p-NFκB P65 等蛋白的表達(dá)，以驗(yàn)證 LCN2 對(duì)巨噬細(xì)胞的調(diào)控作用。Absin 二抗通過(guò)特異性結(jié)合抗 Fn14/TWEAK 一抗，利用 HRP 催化底物發(fā)光，精準(zhǔn)放大蛋白信號(hào)，清晰呈現(xiàn) “LCN2 濃度依賴性升高 Fn14/TWEAK 表達(dá)” 的趨勢(shì)。

2. 場(chǎng)景 2：角質(zhì)形成細(xì)胞 MAPK 通路激活 —— 精準(zhǔn)檢測(cè)磷酸化蛋白
MAPK 通路（ERK1/2、JNK、p38）的激活是 LCN2-TWEAK 協(xié)同促炎癥的關(guān)鍵。在檢測(cè)角質(zhì)形成細(xì)胞中 p-ERK1/2、p-JNK 等磷酸化蛋白時(shí)，Absin 二抗憑借高特異性（無(wú)非特異性條帶）和高靈敏度（可檢測(cè)低豐度磷酸化蛋白），準(zhǔn)確反映了 “LCN2 刺激后通路蛋白磷酸化水平隨時(shí)間 / 濃度升高” 的動(dòng)態(tài)變化，為通路激活提供了直接證據(jù)。

3. 場(chǎng)景 3：敲除小鼠皮膚蛋白驗(yàn)證 —— 可靠區(qū)分表達(dá)差異
在 Lcn2⁻/⁻、Fn14⁻/⁻小鼠皮膚樣本中，研究需對(duì)比野生型（WT）與敲除型的角蛋白（KRT5、KRT14、KRT17）、信號(hào)蛋白（p-ERK1/2）表達(dá)差異。Absin 二抗的信號(hào)穩(wěn)定性確保了 “敲除后蛋白表達(dá)下調(diào)” 的趨勢(shì)可重復(fù)檢測(cè)，例如 Lcn2⁻/⁻小鼠皮膚中 KRT6、KRT16 表達(dá)顯著降低，為 “LCN2 調(diào)控角質(zhì)形成細(xì)胞增殖” 提供了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。