在藥物研發(fā)階段,高靈敏度、樣本兼容性強(qiáng)的檢測技術(shù)至關(guān)重要。瑞孚迪(Revvity)的DELFIA(Dissociation-Enhanced Lanthanide Fluorescent Immunoassay)技術(shù)作為時(shí)間分辨熒光檢測(TRF)的代表平臺(tái),憑借其超低檢測限、寬動(dòng)態(tài)范圍和卓越的抗干擾能力,已成為免疫檢測領(lǐng)域被廣泛采用的技術(shù)方案之一。
DELFIA vs. ELISA為何更勝一籌

DELFIA技術(shù)原理與優(yōu)勢
DELFIA(解離增強(qiáng)鑭系熒光免疫檢測)是一種檢測方法,其操作步驟與ELISA類似,區(qū)別在于DELFIA采用鑭系元素(如銪Eu、鋱Tb、釤Sm等)標(biāo)記的二抗,而ELISA通常使用HRP(辣根過氧化物酶)偶聯(lián)的二抗,兩者的發(fā)光原理存在顯著差異,這使得DELFIA方法在線性范圍和靈敏度方面表現(xiàn)更優(yōu),能夠滿足更高標(biāo)準(zhǔn)的檢測需求。
DELFIA的優(yōu)勢
在加入Enhancement Solution(增強(qiáng)液)之前,加樣板可長期保存,無需立即檢測,為實(shí)驗(yàn)安排提供了更大的便利性。
DELFIA技術(shù)可實(shí)現(xiàn)多指標(biāo)同時(shí)檢測,Eu(615nm)、Sm(643nm)、Tb(545nm)光譜無重疊
該方法對復(fù)雜基質(zhì)樣本(如血清、組織等)具有良好兼容性,能夠有效降低背景干擾,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
DELFIA技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域
01免疫檢測
DELFIA免疫檢測支持方法:直接法、間接法、競爭法,可無縫轉(zhuǎn)換傳統(tǒng)ELISA至DELFIA平臺(tái)。
1.1 靶點(diǎn)結(jié)合與活性篩選
受體-配體相互作用:如GPCR與配體結(jié)合親和力。
蛋白-蛋白結(jié)合:抗體-抗原表位結(jié)合分析(如PD-1/PD-L1阻斷劑篩選)。
1.2細(xì)胞信號(hào)通路研究
磷酸化/總蛋白動(dòng)態(tài)監(jiān)測:如p-ERK/ERK比值(評估MEK抑制劑效果),STAT5磷酸化(JAK-STAT通路激活分析)。
1.3生物標(biāo)志物分析
疾病相關(guān)標(biāo)志物定量檢測:如腫瘤標(biāo)志物(Ki-67)檢測;
炎癥因子在多組學(xué)樣本(血清、組織)中的定量:如IL-6、TNF-α等。
Human IL-2的原理和驗(yàn)證數(shù)據(jù)
02抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)評價(jià)
NK細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷效應(yīng)檢測:靶細(xì)胞預(yù)標(biāo)記TDA,被效應(yīng)細(xì)胞裂解的靶細(xì)胞將TDA釋放到體系中,并與Eu3+形成Eu-TDA復(fù)合物,最終通過檢測Eu-TDA 的時(shí)間分辨熒光信號(hào),來評價(jià)抗體藥物介導(dǎo)的ADCC效應(yīng)。
EuTDA的原理和驗(yàn)證數(shù)據(jù)
03藥物代謝及抗藥物抗體檢測
藥代動(dòng)力學(xué)(PK)研究:抗體類藥物(如貝伐珠單抗)在血清中的濃度;
生物藥免疫原性分析:檢測動(dòng)物血液中阿達(dá)木單抗(抗TNF-α)、英夫利昔單抗的抗體(ADA)產(chǎn)生情況。
ADA的原理和驗(yàn)證數(shù)據(jù)
04細(xì)胞增殖檢測
細(xì)胞增殖分析:由于細(xì)胞增殖過程需要細(xì)胞DNA的復(fù)制,基于檢測DNA合成的方法可以作為細(xì)胞增殖的精準(zhǔn)指標(biāo),BrdU作為一種嘧啶類似物,可以代替胸苷結(jié)合到新合成的DNA中,通過檢測熒光強(qiáng)度判讀細(xì)胞增值情況。
BrdU的原理和驗(yàn)證數(shù)據(jù)
結(jié)論
DELFIA技術(shù)憑借其超高靈敏度、卓越的抗干擾能力和靈活的多重檢測,持續(xù)推動(dòng)藥物研發(fā)的進(jìn)程。無論是基礎(chǔ)研究、還是藥物研開發(fā)階段,DELFIA均為科學(xué)家提供了值得信賴的工具。
產(chǎn)品列表(部分)
耗材推薦
酶標(biāo)儀推薦
多功能酶標(biāo)儀推薦——瑞孚迪VICTOR Nivo多功能酶標(biāo)儀
可檢測可見/紫外光吸收(ABS)、化學(xué)發(fā)光(LUM)、熒光強(qiáng)度(FI)、熒光偏振(FP)、時(shí)間分辨熒光(TRF)、Alpha等多種模式。