病理技術(shù)切片方法
瀏覽次數(shù):2822 發(fā)布日期:2013-7-10
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切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大約在50~100微米左右,質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些,粗切致組織全部暴露后,才進(jìn)行細(xì)切。細(xì)切至組織塊表面均勻一致,無白點(diǎn)后,再把切的蠟片放入溫水中。切片時(shí)要求用力均勻、柔和,搖速不易過快或過慢。過快會導(dǎo)致切片厚薄不均,機(jī)器磨損;過慢會使切片增厚。切片厚度一般為3~5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致,切片的不完整,常會將重要病變遺漏,導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時(shí),應(yīng)注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行,較難切的部分應(yīng)放在上面,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。操作切片機(jī)時(shí)應(yīng)用力均勻,避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓,以及已知的鈣化組織,應(yīng)選用固定的刀口,以減少某他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時(shí)要防止筆絲進(jìn)入刀口,因?yàn)槊壳械揭桓P絲,就會增加一個(gè)缺口。切片厚度一般為4~6微米,有人認(rèn)為:只要Slee切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個(gè)微米,切出來的片子就是幾個(gè)微米。其實(shí)不然,當(dāng)切片刀不鋒利,或切片時(shí)速度不勻,或切的較慢時(shí),切的片子都會變厚,只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下,才能真正保證其厚度。下面是切片時(shí)碰到的問題的原因及可能處理的方法:(1)組織發(fā)脆:一般是脫水、透明、浸蠟時(shí)間過長、溫度過高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān),在切片時(shí),邊切邊用嘴向蠟片吹氣,可能會好些。(2)切片卷起,可能是刀不鋒利,或刀鋒在另一面,或刀角度過大,切片太厚等等。(3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。(4) 透明、浸蠟時(shí)間過長、溫度過高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)(5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊,組織太硬,或切片機(jī)主軸太向前,或切片機(jī)已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕:可能是刀有缺口,石蠟內(nèi)有雜質(zhì),組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié), 也可能會有棉紙纖維等。(7)切片不連片,切不下片,切片很厚,或者切片后蠟塊發(fā)白,內(nèi)陷:組織脫水不佳。補(bǔ)救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(nèi)(80℃),30~60分鐘,再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片,也許會好一點(diǎn)。平時(shí)切片中碰到一些處理不好的標(biāo)本(組織脫水或者是浸蠟不充分)和難切的蠟塊時(shí),在切片時(shí)很容易卷起或切出是碎片,出現(xiàn)這樣的情況就很難撈片。在這里給大家介紹一種方法可以克服這個(gè)問題。把載玻片盒子里的隔離紙撕成和蠟塊大小的面積(普通的薄紙也可以),粘點(diǎn)水貼在已經(jīng)修好片的蠟塊上,再切,紙片上就已經(jīng)粘上了你要切的片子了,直接拿出紙片反向放入漂片機(jī)內(nèi)漂平即可,在切片是散片的情況下應(yīng)注意嚴(yán)格控制水溫,不宜太高。有些老師整天就用此法切片。但這也是我一直反對的做法,原因不在于此法的本身,而在于處理問題的一個(gè)思路,有的技術(shù)員因有了此法,再不考慮如何將脫水不好的組織處理好,反正有辦法應(yīng)付,這樣做出來的片子肯定沒有脫水好的組織質(zhì)量好。所以要求將重點(diǎn)放在組織處理上。只要組織全部處理好了,這方法也就沒用了。